Question

【题目】（1）如图所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000对碱基)上相应的E—F区域 (0.2kb)，那么所形成的重组质粒pZHZ2___________。

A．既能被E也能被F切开

B．能被E但不能被F切开

C．既不能被E也不能被F切开

D．能被F但不能被E切开

（2）已知在质粒pZHZl中，限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0．8kb，限制酶H切割位点距限制酶F切割位点O．5kb。若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样品，据表所列酶切结果判断目的基因的大小为_______kb；并将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在图中。

（3）若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表达产物，则需将重组质粒pZHZ2导入至山羊的______细胞中。若pZHZ2进入细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子山羊的方式是__________。

（4）上述目的基因模板链中的。TGA序列对应一个密码子，翻译时识别该密码子的tRNA上相应的碱基序列是________。一般而言，一个核糖体可同时容纳________分子的tRNA。

（5）下列四幅图中能正确反映目的基因转录产物内部结构的是___________。

TSS：转录起始位点，TTS：转录终止位点，STC：起始密码子，SPC：终止密码子

Answer 1

【答案】 A 1.2 受精卵 转基因山羊间相互交配 UGA 2（或3） B

【解析】试题分析：据图分析，限制酶具有专一性，只能识别特定的DNA序列，并在特定的位点切割磷酸二酯键形成DNA片段，获取目的基因和质粒时切割位点是E和F，重组质粒上含有限制酶E和F的切割位点，所以既能被E也能被F切开。

（1）用限制酶从基因组DNA上切下目的基因，并取代质粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000对碱基）上相应的E-F区域（0.2kb），用DNA连接酶连接后形成重组质粒，则在重组质粒中仍然含有限制酶E和限制酶F的切割位点，形成的重组质粒pZHZ2既能被E也能被F切开，故A正确。
（2）根据题中信息，原来质粒长度为3.7kb，切去EF（0.2kb）之后还有3.5kb，插入目的基因后形成重组质粒，重组质粒的长度为1.6+3.1=1.2+3.5=4.7kb，进而可推导出目的基因长度为4.7-3.5=1.2kb。重组质粒中G的切割位点距E的切割位点0.8kb，单独用限制酶G切割后产生1.6kb和3.1kb两种片段，说明在重组质粒中除了图中标示出来的G酶切位点外，还有一个G酶切位点；H的酶切位点距F0.5kb，用H单独酶切后产生1.2kb和3.5kb两种片段，说明在重组质粒中除了图中标示出来的H酶切位点外，还有一个H酶切位点；根据题中信息提示“将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在图中”，可确定在EF之间分别含有一个G和H的酶切位点，进而可断定G的识别位点，在距E点右侧0.8kb处，H的识别位点在距F左侧0.7kb处，如下图所示：

（3）将目的基因导入动物细胞中，通常以受精卵作为受体细胞，当受精卵发育成山羊后，在雌性山羊的乳汁中可以提取到目的基因的表达产物。重组质粒插入在一条染色体DNA上，可通过雌雄转基因山羊杂交的方法来获取转基因纯合子山羊。

（4）根据碱基互补配对原则，目的基因的模板链中碱基为TGA，则mRNA中对应的密码子为ACU，tRNA中的反密码子为UGA。一般而言，一个核糖体可同时容纳2到3分子的tRNA。
（5）在目的基因的起始端有启动子，末端有终止子，因此转录形成的mRNA初始位置为TSS（转录起始位点），在末端位置有TTS（转录终止位点）；同时mRNA将作为蛋白质合成的直接模板，因此其中含有起始密码子和终止密码子控制翻译过程的进行，两个密码子分别位于TSS内侧和TTS内侧。