Question

【题目】基因工程技术已成为生物科学的核心技术，限制酶被誉为基因工程中的“分子手术刀”．图中的Sma I、EcoR I、BamH I、Hind III都是限制酶，图中的箭头表示几种限制酶的酶切位点．回答下列问题：
（1）基因工程的核心是构建 ． 用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时，不能使用Sma I切割，原因是 ． 重组质粒中抗生素抗性基因可作为标记基因，原因是 ．
（2）将日的基因导入植物细胞时，采用最多的方法是 ． 目的基因进入受体细胞后的表达过程中，启动子需与识别和结合，从而驱动转录过程．最终目的基因是否成功翻译咸蛋白质，常用的方法进行检测，若出现杂交带，表明目的基因已形成蛋白质产品．

Answer 1

【答案】
（1）基因表达载体；SmaI会破坏质粒中的标记基因和外源DNA中的目的基因；它能鉴别受体细胞中是否含有目的基因
（2）农杆菌转化法；RNA聚合酶；抗原﹣抗体杂交
【解析】解：（1）基因工程的核心步骤为基因表达载体的构建．质粒抗生素抗性基因为标记基因，由图可知，标记基因和外源DNA目的基因中均含有SmaI酶切位点，都可以被SmaI酶破环，故不能使用该酶剪切质粒和含有目的基因的DNA．重组质粒中抗生素抗性基因可作为标记基因，它能鉴别受体细胞中是否含有目的基因．（2）将日的基因导入植物细胞时，采用最多的方法是农杆菌转化法．目的基因进入受体细胞后的表达过程中，启动子需与RNA聚合酶识别和结合，从而驱动转录过程．最终目的基因是否成功翻译咸蛋白质，常用抗原﹣抗体杂交的方法进行检测，若出现杂交带，表明目的基因已形成蛋白质产品． 所以答案是：（1）基因表达载体 SmaI会破坏质粒中的标记基因和外源DNA中的目的基因 它能鉴别受体细胞中是否含有目的基因（2）农杆菌转化法 RNA聚合酶 抗原﹣抗体杂交
【考点精析】关于本题考查的基因工程的原理及技术，需要了解基因工程的原理是利用DNA重组技术才能得出正确答案．