题目内容
【题目】在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．如图为获得抗虫棉技术流程．请据图回答： 
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、、将目的基因导入受体细胞、 ．
（2）A过程需要的酶有和 ．
（3）要把重组质粒导入土壤农杆菌，首先必须用处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为态；然后将在缓冲液中混合培养完成转化过程．
（4）含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后，将离体棉花叶片组织培养成再生植株要经过[C]和[E] ． 如要确保再生植株中含有抗虫基因，可在C过程的培养基中加入 ．
【答案】
（1）基因表达载体的构建；目的基因的检测与鉴定
（2）限制酶；DNA连接酶
（3）Ca2+；感受；重组质粒和感受态细胞
（4）脱分化；再分化；卡那霉素
【解析】解：（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定．（2）图中A为基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒．（3）要把重组质粒导入土壤农杆菌，首先必须用Ca2+处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为感受态；然后将重组质粒和感受态细胞在缓冲液中混合培养完成转化过程．（4）植物组织培养包括脱分化和再分化过程，即图中C表示脱分化过程；D表示愈伤组织，E表示再分化．图中标记基因是卡那霉素抗性基因，因此C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入卡那霉素，以淘汰不含重组质粒的细胞． 所以答案是：（1）基因表达载体的构建 目的基因的检测与鉴定（2）限制酶 DNA连接酶（3）Ca2+ 感受 重组质粒和感受态细胞（4）脱分化 再分化 卡那霉素
【考点精析】通过灵活运用基因工程的原理及技术，掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术即可以解答此题．
新课标阶梯阅读训练系列答案
