为了解基因结构.通常选取一特定长度的线性DNA分子.先用一种限制酶切割.通过电泳技术将单酶水解片段分离.计算相对大小,然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解.分析片断大小.下表是某小组进行的相关实验. 已知一线性DNA序列共有5000bp 第一步水解产物第二步水解产物 A酶切割 2100 将第一步水解产物分离后.分别用B酶切割 1900 200 1400 800 60 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

（6分）为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）	第一步水解	产物（单位bp）	第二步水解	产物
A酶切割	2100	将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割	1900 200
1400	800 600
1000	1000
500	500
B酶切割	2500	将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割	1900 600
1300	800 500
1200	1000 200
经A酶和B酶同时切割	1900 1000 800 600 500 200

（1）该实验设计主要体现了原则。

（2）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为个和个。

（3）根据表中数据，请在答题纸图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

（4）已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后“AGATCC//TCTAGG”和“GGATCT//CCTAGA”序列明显增多，该过程中DNA连接酶催化键的形成。

【答案】

（1）对照（单一变量）（2）3 2

（3）（2分）

（4）　磷酸二酯键

【解析】

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已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）	第一步水解	产物（单位bp）	第二步水解	产物（单位bp）
	A酶切割	1900	将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割	1700 200
		1500		800 700
		1600		1100 500

由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为个和个。

为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）	第一步水解	产物（单位bp）	第二步水解	产物（单位bp）
	A酶切割	2100	将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割	1900 200
		1400		800 600
		1000		1000
		500		500
	B酶切割	2500	将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割	1900 600
		1300		800 500
		1200		1000 200
	经A酶和B酶同时切割	1900 1000 800 600 500 200

（1）该实验设计主要体现了__________________原则。
（2）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为______个和____个。
（3）根据表中数据，请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

（4）已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后和序列明显增多。

（8分）为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）	第一步水解	产物（单位bp）	第二步水解	产物（单位bp）
	A切割酶	2100	将第一步水解分离后，分别用B酶切割	1900 200
		1400		800 600
		1000		1000
		500		500
	B酶切割	2500	将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割	1900 600
		1300		800 500
		1200		1000 200
	经A酶和B酶同时切割	1900 1000 800 600 500 200

（1）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为个和
个。
（2）根据表中数据，请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

（3）已知BarnH I与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BarnH工和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后和序列明显增多。

已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）	第一步水解	产物（单位bp）	第二步水解	产物
	A酶切割	2100	将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割	1900 200
		1400		800 600
		1000		1000
		500		500
	B酶切割	2500	将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割	1900 600
		1300		800 500
		1200		1000 200
	经A酶和B酶同时切割	1900 1000 800 600 500 200

（1）该实验设计主要体现了原则。
（2）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为个和个。
（3）根据表中数据，请在答题纸图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

（12分）为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）	第一步水解	产物（单位bp）	第二步水解	产物（单位bp）
A酶切割	2100	将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割	1900 200
1400	800 600
1000	1000
500	500
B酶切割	2500	将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割	1900 600
1300	800 500
1200	1000 200
经A酶和B酶同时切割	1900 1000 800 600 500 200

（1）该实验设计主要体现了__________________原则。

（2）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为______个和_____个。

（3）根据表中数据，请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

（4）已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如下图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后“AGATCC//TCTAGG”和___________序列明显增多，该过程中DNA连接酶催化_________键的形成。

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