Question

4．（1）限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-．在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点．
①画出质粒被限制酶Ⅰ切割后形成的黏性未端：
②画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后形成的黏性未端．
③在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性未端能否连接起来？为什么？能，因为它们有相同的粘性末端．
（2）基因工程技术在培育抗旱植物用于发展沙漠农业和沙漠改造方面显示了良好的前景，荷兰一家公司将大肠杆菌中的海藻糖合成酶基因导入植物（如甜菜、马铃薯等）中并获得有效表达，使“工程植物”增强耐旱性和耐寒性．
（1）根据材料中表达，使“工程植物”增强耐旱性、耐寒性的基本操作步骤是：
①获取目的基因，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测和表达．
（2）写出酶基因在植物体内的表达过程：海藻糖合成酶基因$\stackrel{转录}{→}$mRNA$\stackrel{翻译}{→}$海藻糖合成酶．

Answer 1

分析 关于限制酶，考生可以从以下几方面把握：
（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来．
（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
（3）结果：形成黏性末端或平末端．

解答 解：（1）①限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G^↓GATCC-，因此质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端为：．
②限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-^↓GATC-，因此目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端为：．
③限制性内切酶Ⅰ和限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点不同，但两种切割形成的黏性末端相同，因此可在DNA连接酶的作用下连接起来．
（2）①基因工程的操作步骤为：获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达．
②基因表达的过程包括转录和翻译两个阶段．
故答案为：
（1）①
②
③能    因为它们有相同的粘性末端
（2）①获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达
②海藻糖合成酶基因$\stackrel{转录}{→}$mRNA$\stackrel{翻译}{→}$海藻糖合成酶

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握基因工程各操作步骤中需要注意的细节问题；识记限制酶的作用特点，能结合限制性内切酶Ⅰ和限制性内切酶Ⅱ的识别序列及切割位点准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．