Question

【题目】研究人员利用生物工程技术，探究猪bmp15基因在不同组织细胞中的特异性表达。该工程技术基本流程如下图(EGFP基因控制合成增强型绿色荧光蛋白；过程②表示表达载体2成功导入各组织细胞)。请回答：

(1)过程①中，需利用________________限制酶处理表达载体1。

(2)过程②中，常采用________技术将表达载体2成功导入受体细胞。

(3)在实验结果的基础上，提取上述猪肌肉细胞的____________(填“mRNA”或“DNA”)，利用标记的________作探针，进行分子杂交，可进一步探究猪bmp15基因特异性表达的原因。

Answer 1

【答案】 XhoⅠ和Hind Ⅲ 显微注射 mRNA EGFP基因

【解析】试题分析：本题以探究实验为背景，考查了基因工程的基本操作流程。从图中目的基因上限制酶的切割位点，判断出过程①采用的限制酶的种类；通过基因表达的含义及目的基因分子水平的检测方法来完成（3）的作答。

（1）表达载体需要用和切割目的基因的限制酶相同，保证有相同的粘性末端便于连接，由图可知目的基因是用XhoⅠ和HindⅢ酶切的，故表达载体1也需要用XhoⅠ和HindⅢ酶切。

（2）过程②中，将表达载体2导入动物细胞常用显微注射技术。

（3）检测bmp15基因是否特异性表达应检测是否存在该基因转录出的mRNA，故应提取上述猪肌肉细胞的mRNA，利用标记EGFP基因作为探针，进行分子杂交，若出现杂交带，则表示bmp15基因发生了表达。