题目内容
【题目】（7 分）苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题:
（1）酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳源的有_____________。
（2）将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐_____________。以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集，应进一步_____________，以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加_____________。
（3）下图为连续划线法示意图，在图中_____________ （填图中序号）区域更易获得单菌落。
（4）采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1 ~5号比色管的苯酚浓度应分别为_____________。
管号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
苯酚浓度（mg/ L） | 1 |
如果废水为50 mg/ L 苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，则需将残留液稀释_____________ （填序号：①5 ②10 ③20）倍后，再进行比色。
【答案】（1）蛋白胨、苯酚
（2）增加 稀释涂布 凝固剂
（3）③
（4） 0、0．2、0．4、0．6、0．8 ③
【解析】
（1）碳源是是微生物生长一类营养物，是含碳化合物，其中可作为碳源的有蛋白胨和苯酚。（2）将采集到的样品接种培养的目的是富集酚降解菌，则苯酚用量应随转接次数增加而逐渐增加。平板中菌落过于密集，说明菌种密度过大，应进一步稀释。平板培养基呈固态，应向其中添加凝固剂。（3）下一次划线的起始端是上次划线的末端，随着划线的进行，菌种的密度越来越小，更易形成单菌落，故③区域更易获得菌落。（4）1号管为空白对照管，不加苯酚，6号管中苯酚浓度为1mg/L，2~6号管苯酚浓为0~1mg/L，可判断浓度梯度为0.2mg/L，则2~5号管中苯酚浓度分别是0.2、0.4、0.6、0.8mg/L。废水中苯酚溶液浓度为50 mg/ L，降解后约有21%的苯酚残留，则苯酚溶液浓度为10.5mg/L，由于制作的比色管中苯酚浓度介于0~1mg/L间，则残留液需稀释20倍后，再进行比色。
