题目内容
【题目】血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2或CO2的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。
（1）将实验流程补充完整：A为________________，B为____________________。凝胶色谱法是根据________________________而达到蛋白质分离的有效方法。
（2）洗涤红细胞的目的是去除__________；离心速度过高和时间过长会使____________________一同沉淀，达不到分离的效果。释放血红蛋白的过程中起作用的是________________。
（3）在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是________________________________________________________。
（4）如果红色区带_________________，说明色谱柱制作成功。
【答案】血红蛋白的释放 样品的加入和洗脱 相对分子质量的大小 杂蛋白（血浆蛋白） 白细胞等 蒸馏水和甲苯 模拟生物体内的环境（保持体外pH和体内一致等） 均匀一致的移动
【解析】
（1）样品处理包括：红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液和透析。凝胶色谱操作包括：凝胶色谱柱的制作、凝胶色谱柱的装填、样品的加入和洗脱。
（2）凝胶色谱法的基本原理是根据相对分子质量的大小分离蛋白质。
（3）洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，洗涤干净的标志是上清液中没有黄色。
（4）分离血红蛋白时，可明显看到试管中的溶液分为4层：第一层为无色透明的甲苯层；第2层为白色薄层固体，是脂溶性物质的沉淀层；第3层是红色透明液体，是血红蛋白的水溶液；第4层是其他杂质的暗红色沉淀物。
（5）加样顺序是：调整缓冲液面、滴加透析样品、样品渗入凝胶床、再调整缓冲液面。
（6）如果红色区带均匀一致地移动，说明色谱柱制作成功。
（1）样品处理过程为：红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透析，所以A表示血红蛋白的释放。B表示样品的加入和洗脱。凝胶色谱法的原理是分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。即凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小而达到蛋白质分离的有效方法。
（2）洗涤红细胞的目的是去除杂质蛋白，释放血红蛋白的过程是让红细胞吸水胀破。离心速度过高和时间过长，会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀，得不到纯净的红细胞，影响后续血红蛋白的提取纯度。由于甲苯是表面活性剂的一种，可将细胞膜溶解，从而使细胞破裂。故释放血红蛋白的过程中起作用的是蒸馏水和甲苯。
（3）磷酸缓冲液（pH为7.0）能够准确模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一致。如果凝胶色谱柱装填得很成功、分离操作也正确的话，能清楚地看到血红蛋白的红色区带均匀一致的移动；如果红色区带歪曲、散乱、变宽，说明分离的效果不好，这与凝胶色谱柱的装填有关。
【题目】下图表示某绿色植物部分生理过程，该植物叶片上的气孔白天基本处于关闭状态，晚上开放。请据图回答问题。
（1）图中a、b表示的两个生理过程的场所是________________________。
（2）植物夜晚能吸收CO2，却不能合成(CH2O)，其原因是____________________。白天这类植物进行光合作用所需的CO2还可以由图中________过程产生(填数字)。
（3）与乳酸菌的发酵相比，图中植物呼吸过程中特有的步骤是________(填数字)，这些过程发生的部位在__________________(填细胞器)。
（4）在一定浓度的CO2和适当的温度(25℃)条件下，测定该植物在不同光照条件下的光合速率，结果如下表，据表中数据回答问题。
光合速率与呼吸速率相等时光照强度/klx | 光饱和时光照强度/klx | 光饱和时CO2吸收量(mg/100 cm2叶·h) | 黑暗条件下CO2释放量(mg/100cm2叶·h) | |
小麦 | 3 | 9 | 32 | 8 |
当光照强度为3 klx时，小麦固定的CO2的量为________(mg CO2/100 cm2叶·h)，当光照强度为9 klx时，小麦固定的CO2的量为_______(mgCO2/100 cm2叶·h)。
