题目内容
【题目】2006年,Yamanaka将Oct﹣4、Sox2、c﹣Myc和K1f4四个转录因子导入小鼠胚胎成纤维细胞,获得“诱导多能干细胞”(iPSc)。虽然iPSC具有非常高的应用价值和前景,但应用于临床仍有问题阻碍,例如其供体细胞需从患者皮肤穿刺获得皮肤成纤维细胞,给患者带来痛苦,同时诱导效率非常低,初始化效率甚至低于0.01%. 因此近年来iPSc研究热点为如何选用来源便捷、数目充足的成熟体细胞,以及如何提高基因的转录效率。
(1)iPSc能在适当的诱导条件下分化为3个胚层的细胞,具有多能分化能力,类似_____细胞的特性。
(2)有科学家利用成熟的T淋巴细胞作为供体细胞,成熟的T淋巴细胞在体外不能增殖分化,利用刀豆蛋白A(ConA)活化成熟T淋巴细胞,使之增殖分化为_____细胞,在这里刀豆蛋白A(ConA)充当_____。
(3)为提高诱导为iPSc的效率,首先应提高运载体的导入受体细胞的效率,科学家利用HIV﹣1病毒改造的(无致病性,高感染性)慢病毒作为载体,这类慢病毒属于_____(RNA/DNA)病毒。同时在慢病毒中构建GFP基因(绿色荧光蛋白基因)作为_____,以便直观方便的检验慢病毒是否导入受体细胞。
(4)为验证慢病毒对T淋巴细胞的转导效率,科学家用腺病毒转导T淋巴细胞作为对照,设置不同MOI(MOI=转染时的病毒颗粒数/细胞数)实验组得到下图结果,由此可得出的结论为_____________________________________________________________________________。
【答案】胚胎肝细胞 效应T细胞、记忆 抗原 RNA 标记基因 在相同的MOI下与腺病毒相比,慢病毒的转导效率有明显提高,且随着MOI的提高对T淋巴细胞的转导效率也越高
【解析】
干细胞是具有分裂和分化能力的细胞,细胞的分化程度越高,分裂能力越强,因此,高度分化的细胞一般不会分裂,但是利用转基因技术将有关基因导入到分化的细胞中,使细胞恢复分裂和分化能力。
(1)胚胎肝细胞是具有分裂和分化能力,能够发育成不同的组织和器官,iPSc能在适当的诱导条件下分化为3个胚层的细胞,具有多能分化能力,因此,类似胚胎干细胞的特性。
(2)细胞免疫过程中,T细胞增殖分化形成记忆细胞和效应T细胞,因此这里刀豆蛋白A(ConA)充当抗原。
(3)HIV病毒的遗传物质是RNA,这类病毒RNA病毒,在构建基因表达载体时,绿色荧光蛋白基因作为标记基因以便直观方便的检验慢病毒是否导入受体细胞。
(4)分析柱状图可知,实验的自变量是病毒的种类和不同的MOI,因此,在相同的MOI下与腺病毒相比,慢病毒的转导效率明显提高,且随着MOI的提高对T淋巴细胞的转导效率也提高。