题目内容
【题目】基因表达载体的构建是基因工程的核心。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图2表示目的基因及限制酶切点，图3表示质粒。回答下列问题：
（1）用图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其特异性而言，切开的是_________之间相连的化学键，该化学键为_________。
（2）采用PCR扩增目的基因的原理是_________。图2中A、B、C、D4种单链DNA片段中，有_________两种引物（DNA复制子链的延伸方向5′→3′）。
（3）在构建目的基因表达载体时，用PstⅠ、EcoRⅠ两种酶同时切割目的基因和质粒，是为了防止一种酶切割时造成_________。不选用限制酶PstⅠ和HindⅢ同时对质粒和目的基因进行切割的原因是_________。
（4）目的基因进入受体细胞并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为_________；要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，经常采用的检测方法是_________技术。
【答案】鸟嘌呤脱氧核苷酸和腺嘌呤脱氧核苷酸 磷酸二酯键 DNA复制 B、C 目的基因与运载体反向连接 会破坏标记基因 转化 DNA分子杂交
【解析】
据图分析可知，EcoRI可以识别GAATCC序列，且可以在G和A之间切割；为防止目的基因自身环化，通常需用两种酶进行同时切割目的基因和质粒，以形成相同的黏性末端。
（1）DNA分子的一条多核苷酸链中，两个脱氧核苷酸之间以磷酸基团和五碳糖相连，该化学键是磷酸二酯键；由题目可知，EcoRⅠ识别的DNA序列只有G和A，故切开的是鸟嘌呤脱氧核苷酸和腺嘌呤脱氧核苷酸之间相连的化学键；
（2）PCR扩增目的基因的原理是DNA复制；若利用PCR技术增加目的基因的数量，由图2可知，DNA复制只能从5’到3’，因此A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取 B和C作为引物；
（3）为防止目的基因与运载体反向连接，在构建目的基因表达载体时，需用PstⅠ、EcoRⅠ两种酶同时切割目的基因和质粒；据图分析可知，标记基因抗四环素基因和抗青霉素基因上分别有HindⅢ和PstⅠ的切割位点，故为避免标记基因被破坏，不选用限制酶PstⅠ和HindⅢ同时对质粒和目的基因进行切割；
（4）目的基因进入受体细胞并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为转化；要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，经常采用的检测方法是DNA分子杂交技术。
【题目】请回答下列与植物生命活动调节有关的问题：
（1）“唤醒沉睡的种子，调控幼苗的生长。引来繁花缀满枝，瓜熟蒂落也有时。靠的是雨露阳光，更离不开信息分子。”文中的“信息分子”是指_____，其中“唤醒沉睡的种子”的主要是_____：其合成部位主要是_____和幼芽；与“瓜熟蒂落”有关的主要是_____。
（2）根据上文描述可以推论：植物的生长发育过程是_____的结果。
（3）通常，叶片中叶绿素含量下降可作为其衰老的检测指标。为研究相关激素对叶片衰老的影响，用银杏离体叶片进行分组实验得到如下结果：
| 蒸馏水 | CTK | ABA | CTK+ABA |
24小时 | 90 | 100 | 80 | 94 |
48小时 | 68 | 96 | 33 | 76 |
72小时 | 24 | 91 | 16 | 46 |
据表分析可得出的结论是：_____。
【题目】某同学为研究生长素类似物2，4—D对某植物插条生根的影响，所做实验处理及插条生根数与无2，4—D处理插条生根数的比值如表所示。下列叙述正确的是
2，4D（ml/L） | 0 | 100 | 500 | 1000 | 1500 | 2000 |
插条平均生根数比值 | 1 | 1.2 | 3.45 | 2.95 | 1 | 0.45 |
A. 插条上侧芽的数目及饱满程度不会影响实验结果
B. 该植物插条生根最适的2，4-D溶液浓度为500mg/L
C. 2，4—D为0mg/L的处理是对照组
D. 浓度为lOOOmg/L以上的2，4—D溶液就会抑制插条生根
