题目内容
【题目】已知新型冠状肺炎(COVID-2019)的病原体为RNA病毒,被命名为SARS-CoV-2,该病毒表面的S蛋白为主要抗原。某生物科技小组设计了疫苗的生产和单克隆抗体的制备流程如图所示。请回答下列问题:
(1)过程①代表的是___________,过程②所构建S基因重组载体中,___________是重新构建的,它们应该能被受体细胞的RNA聚合酶所识别。
(2)在给小鼠皮下注射S蛋白时,要重复注射几次,其目的是___________。
(3)在将X进行扩大培养前,至少需要经过2次筛选,第一次是将___________筛选出来,第二次是将___________筛选出来。
(4)对健康人进行SARS-CoV-2免疫预防时,可以用灭活的SARS-CoV-2或图中基因工程生产的_____来制备疫苗。对COVID-2019疑似患者确诊时,可以从疑似患者体内分离出病毒,与SARS-CoV-2进行核酸序列比较,或与图中的___________进行特异性检测。
【答案】逆转录 启动子和终止子 通过二次免疫,增加小鼠体内的浆细胞数目 杂交瘤细胞 能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 S蛋白 抗S蛋白的单克隆抗体
【解析】
分析题图可知,图示为利用基因工程和动物细胞融合技术制备抗S蛋白单克隆抗体的流程,利用SARS-CoV-2病毒RNA经过①过程逆转录得到病毒DNA,之后通过PCR技术扩增获得大量S蛋白基因。②过程为基因表达载体的构建,基因表达载体必须包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
(1)由分析可知,过程①代表逆转录;过程②为基因表达载体的构建,S基因重组载体中的启动子是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因的转录,终止子位于基因的尾端,也能被RNA聚合酶识别,使转录在需要的地方停止。
(2)在给小鼠皮下注射S蛋白时,要重复注射几次,其目的是通过二次免疫,增加小鼠体内的浆细胞数目,以利于之后的提取与细胞融合。
(3)分析图示过程可知,X为能产生抗S蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,在将X进行扩大培养前,至少需要经过2次筛选,第一次是将杂交瘤细胞筛选出来,第二次是将能分泌所需抗体的杂交瘤细胞筛选出来。
(4)对健康人进行SARS-CoV-2免疫预防时,可以用灭活的SARS-CoV-2病毒或图中基因工程生产的S蛋白来制备疫苗,因为蛋白质不具侵染性,不会破坏细胞结构。对COVID-2019疑似患者确诊时,可以从疑似患者体内分离出病毒,与SARS-CoV-2进行核酸序列比较,或与图中的抗S蛋白的单克隆抗体进行抗原—抗体特异性检测,若产生杂交带,说明有病毒存在。
