Question

【题目】人肺细胞中的let -7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let -7基因导人肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图：

请回答：

(1)理论上，基因组文库含有生物的_______基因；而cDNA文库中含有生物的_______基因。

(2)进行过程①时，需用__________酶切开载体以插入let -7基因；载体应含有启动子序列，该序列的作用为__________；有时候被切开的载体并没有插入let -7基因而形成空载的载体，此时可用含有_______序列的引物对载体进行PCR扩增，并通过检测扩增产物来筛选出重组载体。

(3)图中对肺癌组织块的处理应是__________，进行过程②时，需用胰蛋白酶处理贴附在培养皿壁上的细胞以避免出现_________现象，从而有利于传代培养。

Answer 1

【答案】全部 部分 限制性核酸内切酶（限制酶） （提供RNA聚合酶识别、结合位点并）开启目的基因的转录 let -7基因 先剪碎再用胰蛋白酶处理 接触抑制

【解析】

基因文库包括基因组文库和cDNA文库，基因组文库中包含了某种生物的所有基因，cDNA文库含有该种生物的部分基因，也叫部分基因文库。过程①表示基因工程操作步骤中基因表达载体的构建，在该过程中需要用限制性核酸内切酶对载体进行切割，以便于目的基因的插入；过程②表示动物细胞培养，传代时用胰蛋白酶处理，使之分散成单个细胞，随后分装到新的培养瓶中进行培养。

(1)基因组文库含有生物的全部基因，而cDNA文库中含有生物的部分基因。

(2)进行过程①时，需用限制性核酸内切酶切开载体以插入let -7基因；载体含有启动子序列，启动子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶识别和结合的位点，RNA聚合酶结合到该位点，可驱动转录过程；有时候被切开的载体并没有插入let -7基因而形成空载的载体，此时可用含有let -7基因序列的引物对载体进行PCR扩增，并通过检测扩增产物来筛选出重组载体。

(3)图中对肺癌组织块的处理应是先剪碎再用胰蛋白酶处理，进行过程②时，需用胰蛋白酶处理贴附在培养皿壁上的细胞以避免出现接触抑制现象，从而有利于传代培养。