题目内容

【题目】下图为“DNA粗提取和鉴定”实验的相关操作;表是研究人员比较了不同贮藏条件对棉叶DNA纯度及提取率的影响结果。请回答下列问题:

不同贮藏条件

鲜叶

冷鲜3d

冷冻3d

冷冻7d

液氮7d

DNA纯度

200

191

192

173

169

DNA提取率

210

198

347

39

126

DNA纯度单位:OD260/OD280值) DNA提取量单位:

1)棉叶细胞中含有DNA的细胞结构有_____________

2)图中①、②、③三个操作图,按照DNA粗提取操作流程的排序是_____________,三个步骤操作后均需进行过滤,完成过滤之后弃去滤液的序号是_____________

3)图1中①的具体操作是_____________

4)用二苯胺试剂鉴定,颜色最深的是表中_____________处理后提取的DNA,鉴定中的溶液颜色变化是_____________

5)针对第(4)小题的结果,请提出两点合理的解释__________________________

【答案】叶绿体、线粒体和细胞核 ②①③ ①和③ 取适量蒸馏水沿烧杯内壁缓缓加入,并用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌 冷冻3d 逐渐变蓝 在低温条件下DNA分子结构稳定 储存天数的增加导致DNA分子容易降解,所以纯度降低

【解析】

DNA的粗提取与鉴定的实验原理是:

DNA的溶解性,DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同,利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出,从而达到分离的目的;

DNA不容易酒精溶液,细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精,利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离;

DNA对于酶、高温和洗涤剂的耐受性,蛋白酶能水解蛋白质,但是不能水解DNA,蛋白质不能耐受较高温度,DNA能耐受较高温度洗涤剂能瓦解细胞膜,但是对DNA没有影响;

④在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。

1)棉叶细胞含有DNA的细胞结构有叶绿体、线粒体和细胞核。

2DNA粗提取的流程是,先用蒸馏水使细胞吸水涨破,释放出DNA,用2moL/LNaCl溶液将DNA分子溶解,然后不断的稀释,稀释NaCl溶液的浓度,降低DNA分子溶解度,再将DNA分子溶解后加入冷的95%的酒精进行提纯,所以正确的顺序是②①③;①加入蒸馏水析出DNA分子,过滤后出去滤液,②是用蒸馏水使细胞吸水涨破,过滤后收集滤液;③是加入冷的酒精,析出DNA分子,出去滤液,所以需要出去滤液的是①和③。

3)①是加入蒸馏水,降低NaCl的浓度,使DNA的溶解度降低,析出DNA分子,操作中取适量蒸馏水沿烧杯内壁缓缓加,并用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌,直至丝状物不在增加。

4)冷冻3d处理提取的DNA量是最多的,因此用二苯胺试剂鉴定,颜色最深的是冷冻3d处理后提取的DNADNA的鉴定过程中颜色变化是颜色逐渐变蓝。

5)从表格中的数据看出叶片越新鲜,DNA的纯度越高,储存温度越低DNA提取率越高,可能的原因是在低温条件下DNA分子结构越稳定,而储存天数的增加导致DNA分子容易降解,所以纯度降低。

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