Question

【题目】如图为构建某重组质粒的过程示意图．lacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X﹣gal，从而使菌落显现出蓝色，若无该基因，菌落则成白色．图中甲﹣﹣戊DNA片段只注明了黏性末端处的碱基种类，其它碱基的种类未作注明．

（1）若酶M特异性识别的DNA碱基序列是 ，则酶N特异性识别的DNA碱基序列是 ．
（2）过程②是将所有片段混合在一起，用酶拼接可得到不同的重组DNA．
（3）如果只考虑2个片段的组合，那么甲、乙、丁三个片段中能够形成环状DNA的片段组合是（ ）（多选）
A.甲和乙
B.甲和甲
C.甲和丁
D.乙和乙
E.乙和丁
F.丁和丁
（4）为了筛选含重组质粒的受体菌，应在通用培养基中额外加入 ， 培养一段时间，挑选出色的菌落进一步培养．原来质粒中，限制酶M和N的酶切位点应该位于 ．
A．M位于青霉素抗性基因中，N位于lacZ基因中
B．N位于青霉素抗性基因中，M位于lacZ基因中
C．M和N都位于青霉素抗性基因中
D．M和N都位于lacZ基因中
（5）上述目的基因能够在受体细菌中表达，其原因是不同生物（ ）
A.共用一套DNA
B.共用一套RNA
C.共用一套蛋白质
D.共用一套密码子

Answer 1

【答案】
（1）
（2）DNA连接酶
（3）ABCDEF
（4）青霉素和X﹣gal；白；D
（5）D
【解析】解：（1）由以上分析可知，酶N特异性识别的DNA碱基序列是 ．（2）DNA连接酶可以将具有相同黏性末端的DNA片段连接起来．（3）甲、乙、丁都有两个黏性末端，且都相同，因此如果只考虑2个片段的组合，那么甲、乙、丁三个片段中任意两个连接都能够连接形成环状DNA．（4）为了筛选含重组质粒的受体菌，应在通用培养基中额外加入青霉素和X﹣gal，培养一段时间，挑选出白色的菌落进一步培养．这表明青霉素抗性基因没有被破坏，lacZ基因已经被破坏，因此在原来质粒中，限制酶M和N的酶切位点都位于lacZ基因中．（5）上述目的基因能够在受体细菌中表达，其原因是不同生物共用一套密码子．
所以答案是：（1） （2）DNA连接酶（3）ABCDEF（4）青霉素和X﹣gal 白 D（5）D
【考点精析】根据题目的已知条件，利用基因工程的原理及技术的相关知识可以得到问题的答案，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术．