Question

【题目】下面是利用基因工程、胚胎工程等技术以牛为对象进行的研究工作，请分析回答问题：

（1）基因工程的基本操作流程中，当获取目的基因后，在将其导入受体细胞前需要进行一个 重要的操作步骤，即构建______________，该步骤使用的两种工具酶分别是______________。一个完整的基因表达载体中______________是RNA聚合酶识别、结合的部位。

（2）从公牛体内采集的精子需经过______________处理，才能在体外与成熟卵细胞结合形成 受精卵。将目的基因导入受精卵中，受精卵在体外培养至早期胚胎，再移植到母牛子宫中。进行胚胎移植的优势是可以________________________________________________________。

（3）在早期胚胎时期取滋养层细胞通过______________方法进行DNA检测，来判断目的基因是否导入细胞中。外源基因是否合成相应的蛋白质，可从转基因牛中提取蛋白质，并用相应的抗体进行“_____________”杂交，若有杂交带出现，则表明牛体内的外源基因______________（填“已表达”或“未表达”）。

Answer 1

【答案】 基因表达载体 限制酶、DNA连接酶 启动子 获能 充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，大大缩短了供体本身的繁殖周期 DNA分子杂交 抗原一抗体 巳表达

【解析】试题分析：本题组要考查了基因工程的原理和技术、胚胎移植等技术，通过分析基因工程技术的基本步骤及胚胎移植优点，再结合题中问题进行解答。

（1）基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达，其中基因表达载体的构建是基因工程中最核心的步骤，构建基因表达载体的步骤中，首先需要限制酶切割外源DNA分子和运载体，其次还需要DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，其中启动子是RNA聚合酶识别、结合的部位。

（2）进行体外受精前，需要对获得的精子进行获能处理，使精子具有受精的能力；进行胚胎移植的优势是充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，大大缩短了供体本身的繁殖周期。

（3）检测外源基因是否导入受体细胞用DNA分子杂交技术；检测是否成功表达蛋白质采用抗原-抗体杂交技术，即从转基因小鼠中提取蛋白质，并用相应的（单克隆）抗体与提取的蛋白质者进行杂交，若能杂交，则表明小鼠体内的外源基因已表达。