题目内容

【题目】为增加油葵种子中的含油量,科学家尝试将花生中的酶A基因导入油葵细胞获得转基因油葵新品种。

1为获取目的基因,可从花生细胞中提取_____________,经逆转录形成cDNA。以此cDNA为模板通过PCR技术扩增目的基因。

2构建重组DNA分子如图所示最好选用__________限制酶,目的是可避免____________________

3普通大肠杆菌细胞中没有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因,将构建的重组DNA分子导入农杆菌中,将获得的农杆菌接种在含_______________的固体平板上培养得到含重组质粒的单菌落,再利用培养基震荡培养,可以得到用于转化的浸染液。

4剪取油葵的叶片放入浸染液中一段时间后,经过筛选获得转基因油菜细胞。最后经过__________________培育成转基因油葵植株。此种技术的原理是______________

5研究发现,如果将该酶A的20位和24位氨基酸变为半胱氨酸,其催化能力将提高2倍。通过蛋白质工程对酶A进行改造,所需步骤有______________

a蛋白质的结构设计

b蛋白质的结构和功能分析

c蛋白质结构的定向改造

d酶A基因的定向改造

e将改造后的A慕因导入受体细胞

f将定向改造的酶A导入受体细胞

6经过种植转基油葵发现,虽然转因油葵种子含油上升,但是抗灰菌的能力丢失,其原因是_____________________

【答案】1mRNA1分 2BamH 和Pst 质粒自身的粘性末端连接或目的基因与质粒反向连接 3氨苄青霉素 4植物组织培养技术 植物细胞的全能性 5b、a、d、e选择对即可,不要求排序 6抗灰霉菌基因没有表达或丢失等

【解析】1逆转录过程需要供体细胞内的提取出mRNA为模板,以脱氧核苷酸为原料来合成cDNA。2构建重组DNA分子时选用的限制酶要不破坏目的基因,所以不能选用EcoR;同时尽量防止质粒自身的粘性末端连接或目的基因与质粒反向连接, 所以最好选用两种限制酶,即BamH 和Pst3根据限制酶的切割位点,由于使用BamH 和Pst会破坏抗四环素的标记基因,但抗氨苄青霉素的标记基因是完整的,所以只能用含氨苄青霉素的培养基筛选含重组质粒的单菌落。4得到转基因细胞后,要培养成转基因植株,需要用植物组织培养技术才能实现,其依据的原理是植物细胞的全能性。5蛋白质工程包含的步骤依次是:蛋白质的结构和功能分析蛋白质的结构设计酶A基因的定向改造将改造后的A基因导入受体细胞获得所需的蛋白质6因油葵种子含油上升,但是抗灰菌的能力丢失,其原因可能是抗灰霉菌基因没有表达或丢失等。

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