题目内容
【题目】科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图所示,请回答相关问题:
(1)过程①获得重组胚胎之前需要通过___________技术获得重组细胞,通过显微操作去除MⅡ期卵母细胞中的核,用微型吸管可一并吸出______________________。
(2)步骤②中,重组胚胎培养到囊胚期时,可从其________________分离出ES细胞。步骤③中,需要构建含有干扰素基因的________________。构建之前可以利用PCR技术对目的基因进行扩增,PCR技术的原理是___________。
(3)将基因导入ES细胞常用的方法是_____________。体外诱导ES细胞向不同方向分化是利用了ES细胞的___________。
(4)为检测干扰素基因的转录情况,可采用___________方法,若有杂交带出现,表明目的基因已成功转录出mRNA。
【答案】 核移植 细胞核和第一极体 内细胞团 (基因)表达载体 DNA双链复制 显微注射 全能性 分子杂交技术
【解析】试题分析:分析题图:图示是利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的流程,其中①表示通过核移植技术获得重组胚胎的过程;②表示早期胚胎培养过程;③表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞的过程。
(1)根据以上分析已知,①表示通过核移植技术获得重组胚胎的过程;核移植前要先用显微操作的方法去除卵母细胞的细胞核,并将第一极体也一并除去。
(2)ES细胞可以从囊胚的内细胞团中分离出来;步骤③将目的基因导入受体细胞时,需要先构建含有目的基因(干扰素基因)的表达载体;PCR技术可在体外大量扩增目的基因,其原理是DNA双链复制。
(3)将目的基因导入ES细胞(动物细胞)最有效的方法是显微注射法;体外诱导ES细胞向不同方向分化是利用了ES细胞的全能性。
(4)检测干扰素基因的转录情况,,可采用分子杂交技术,若有杂交带出现,表明目的基因已成功转录出mRNA。
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