题目内容
【题目】2020年初，武汉出现了不明原因的肺炎，经检测是由一种新型冠状病毒（NCP）引起的。科研人员正在加紧研制生产NCP的疫苗和探索相应抗体的制备。回答有关的问题：
（1）科研人员提出用康复者血清治疗新冠型肺炎，是因为康复者血清中存在_______（填“抗原”或“抗体”），但该方法存在缺陷，如_______________（答出一点即可）。
（2）针对血清治疗存在的缺陷，研究者从治愈患者捐献的血液中提取浆细胞，然后用_______诱导该细胞和骨髓瘤细胞发生融合。几经努力，最终生产出单克隆抗体，此种方法生产的抗体具有______________________的优点。
（3）科研人员还设想将控制无限增殖的基因（记作X基因）转入人的浆细胞，构建出产生单克隆抗体的细胞系。用PCR技术扩增X基因的前提是需要知道______。若在浆细胞中的染色体DNA上检测到X基因，但该浆细胞死亡或不能增殖，则原因最可能是_______________________。
【答案】抗体 血清成分复杂，对于是否会引起其他问题还存在不确定性
角度二：需要的血清数量比较大（血清抗体含量少）
角度三：血清抗体纯度低，特异性差 灭活的病毒（聚乙二醇、PEG、离心、电激、振动等均可） 特异性强、灵敏度高、并可大量制备 X基因的（一段）核苷酸序列 X基因的插入破坏了浆细胞生命活动必需的某些基因角度二：X基因没有表达，所以不增殖
【解析】
1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
（1）康复者的血清中含有抗新型冠状病毒的抗体，因此有科研人员建议用康复者的血清来治疗患者，但存在血清成分复杂，对于是否会引起其他问题还存在不确定性或需要的血清数量比较大或血清抗体纯度低，特异性差等问题，该方法还存在一定的缺陷。
（2）可以采用灭活的病毒或利用聚乙二醇等诱导将浆细胞和骨髓瘤细胞融合。单克隆抗体与普通血清抗体相比较，最主要的优点在于它的特异性强，灵敏度高，并可大量制备。
（3）若用PCR技术扩增X基因，则需要用到热稳定DNA聚合酶，该方法能够成功获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物，以便于扩增X基因。若X基因的插入破坏了浆细胞生命活动必需的某些基因，或者X基因导入浆细胞后没有表达，都可能导致在浆细胞中的染色体DNA上检测到X基因，但该浆细胞死亡或不能增殖等现象。
