Question

【题目】基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据下图示判断下列操作正确的是(　　)

A. 目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 B. 质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

C. 目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 D. 质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

Answer 1

【答案】D

【解析】限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制酶II的识别序列和切点是-↓GATC-，可知限制酶Ⅱ能够识别和切割限制酶Ⅰ切割后的黏性末端。据题图可知，目的基因两端分别是限制酶Ⅰ的识别序列和切点（是-G↓GATCC-）和限制酶Ⅱ的识别序列和切点（是-↓GATC-），只有用限制酶Ⅱ才能同时将目的基因切割下来；质粒有GeneⅠ和GeneⅡ表示两种标记基因，分别有限制酶Ⅱ的识别序列和限制酶Ⅰ的识别序列，如果用限制酶Ⅱ切割，则GeneⅠ 和GeneⅡ都被破坏，造成重组质粒无标记基因；用限制酶Ⅰ切割，则破坏GeneⅡ，保留GeneⅠ，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，可以连接形成重组DNA，故选D。