题目内容
【题目】【加试题】回答下列（一）、（二）小题。
（一）回答与果酒、果醋制作有关的问题。
（1）在酿酒过程中，酵母菌只有在无氧条件下才能进行___________。发酵开始时，发酵瓶内看不到气泡冒出的原因可能是酵母菌的___________使发酵瓶内出现负压。
（2）下列各项中，与果酒中的酒精浓度有关的是___________（多选）。
A.发酵时间
B.发酵温度
C.培养液中糖的含量
D.酵母菌对酒精浓度的耐受程度
（3）不同地域所酿制的葡萄酒风味会有一定的差异，出现风味差异的原因除了与当地相应的土壤、气候等地理环境因素和葡萄品种有关外，还可能与不同地域酿酒时所用的___________等生物因素有关。
（4）在利用果酒制作果醋过程中，如果已获得醋化醋杆菌菌种，可先在液体培养基中进行___________培养，然后接种到发酵瓶中。发酵瓶下口直角玻璃管内塞有松紧合适的脱脂棉球，其作用是___________。开始收集果醋前，应检测发酵瓶流出液的___________。
（二）通过农杆菌介导转入法培养转基因植物的过程如下图（图中①④表示相应操作过程）。请回答：
（1）如果外源基因的核苷酸序列是未知的，可以建立一个包括外源基因来源生物中所有基因的_________来获取外源基因。图中②过程涉及的工具酶是___________。
（2）将外源遗传物质与受体植物细胞（包括原生质体受体）遗传物质重新组合，除了转基因技术外，还有
___________等方法，这些方法解决了传统育种方法存在的___________的缺陷。植物原生质体的获取可以在较高渗透压环境下，用___________酶处理根尖、叶片、愈伤组织或悬浮培养细胞的细胞壁。
（3）如果构建重组细胞的目的是为了获取重要的次生代谢产物（如某些中药），可以通过大量培养特定______________________来达成目的。
（4）如果农杆菌侵染对象为某植物叶片，将被侵染的叶片除菌后进行培养，最终得到转基因植物。下列叙述中正确的是__________________。
A.愈伤组织在合适条件下经脱分化形成再生植株
B.再生的芽在细胞分裂素含量较高的培养基上生根
C.叶片在含合适浓度生长素的培养基上经再分化形成愈伤组织
D.愈伤组织在细胞分裂素和生长素配比较髙的培养基上形成芽
【答案】 酒精发酵 需氧呼吸 ABCD 菌种 扩大 过滤空气 pH 基因文库 DNA连接酶 细胞融合或显微注射 远缘亲本难以杂交（或生殖隔离） 纤维素酶和果胶 细胞系 D
【解析】试题分析：本题考查果酒和果醋的制作、基因工程和植物细胞工程的基本操作原理的有关知识，意在考查考生对知识的识记、理解和运用能力。
（一）
（1）在酿酒过程中，酵母菌只有在无氧条件下才能进行酒精发酵。发酵开始时，发酵瓶内看不到气泡冒出的原因可能是酵母菌的需氧呼吸使发酵瓶内出现负压。
（2）在酵母菌的厌氧呼吸中，在细胞中酶的催化下，葡萄糖经过一系列化学反应，分解成不彻底的酒精和CO2，并合成少量能量。在该过程中，酒精产量的多少，受到发酵时间、发酵温度、培养液中糖的含量和酵母菌对酒精浓度的耐受程度的影响。
（3）不同地域所酿制的葡萄酒风味会有一定的差异，出现风味差异的原因除了与当地相应的土壤、气候等地理环境因素和葡萄品种有关外，还可能与不同地域酿酒时所用的菌种等生物因素有关，因为不同菌种产生的酶存在差异。
（4）液体培养基可用于菌种的扩大培养。发酵瓶下口直角玻璃管内塞有松紧合适的脱脂棉球，其作用是过滤空气，防止杂菌污染。醋化醋杆菌会将果酒转化成果醋，导致发酵液pH值下降，因此开始收集果醋前，应检测发酵瓶流出液的pH值。
（二）
（1）如果外源基因的核苷酸序列是未知的，可以建立一个包括外源基因来源生物中所有基因的基因文库来获取外源基因。图中②过程是构建基因表达载体，涉及到的工具酶是DNA连接酶。
（2）将外源遗传物质与受体植物细胞（包括原生质体受体）遗传物质重新组合，除了转基因技术外，还有细胞融合或显微注射。这些方法解决了传统育种方法存在的远缘亲本难以杂交（或生殖隔离）的缺陷。植物的细胞壁主要成分是纤维素和果胶，因此可以在较高渗透压环境下，用纤维素酶和果胶酶处理根尖、叶片、愈伤组织或悬浮培养细胞的细胞壁。
（3）获取重要的次生代谢产物（如某些中药）可通过破碎细胞来获得，可以通过大量培养特定细胞系来达成目的。
（4）将被农杆菌侵染的叶片除菌后进行植物组织培养，可得到转基因植物。该过程需经过脱分化生成愈伤组织，然后再分化生成胚状体或丛芽，进而获得转基因植物。培养基中细胞分裂素和生长素配比较低时形成根，配比较高时形成芽，比例适中时形成愈伤组织。愈伤组织在合适条件下经再分化形成再生植株，A项错误；再生的芽在生长素含量较高的培养基上生根，B项错误；叶片在含合适浓度生长素的培养基上经脱分化形成愈伤组织，C项错误；愈伤组织在细胞分裂素和生长素配比较髙的培养基上形成芽，D项正确。
