题目内容
【题目】抗体是一种由浆细胞分泌,用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的一类蛋白质。下列是制备抗体的两个生物技术途径模式图
(1)制备抗体1的过程中,先给小鼠注射一种纯化的抗原蛋白,一段时间后,从小鼠的_________ (填“骨髓”或“脾脏”)中获取多个B淋巴细胞与多个骨髓瘤细胞诱导融合,而不取两个细胞诱导融合的原因是_____________。
(2)制备抗体2的过程中,导入到大肠杆菌细胞中的鼠基因能表达出相应的蛋白质,这说明了______________。
(3)抗体2制备过程中,将mRNA逆转录为cDNA再进行PCR扩增被称为RT-PCR技术,RT-PCR过程需要的酶有________。将V1基因与普通质粒经某种限制酶切割连接并成功导入大肠杆菌细胞后,发现仍有部分细胞不能表达出抗体2,最可能的理由是_______。
(4)可用______________法检测受体细胞中是否真正成功表达了病毒S蛋白。
【答案】脾脏 融合率低,获取的B淋巴细胞不一定是所需 所有生物共用一套遗传密码 逆转录酶和Taq酶 目的基因与质粒载体反向拼接 抗原―抗体杂交
【解析】
题图细胞A表示效应B细胞,细胞Y表示杂交瘤细胞,①过程表示动物细胞融合,②过程动物细胞培养,③过程提取信使RNA,④过程表示逆转录,⑤表示基因表达载体的构建,⑥表示导入受体细胞。据此分析作答。
(1)在制备抗体1的过程中,先给小鼠注射一种纯化的抗原蛋白,一段时间后,从小鼠的脾脏中获取多个B淋巴细胞与多个骨髓瘤细胞诱导融合,而不取两个细胞诱导融合的原因是融合率低,获取的B淋巴细胞不一定是所需要的。
(2)在制备抗体2的过程中,由于所有生物共用一套遗传密码,所以导入到大肠杆菌细胞中的鼠基因就能表达出相应的蛋白质。
(3)由题意分析可知,RT-PCR过程需要的酶有逆转录酶和Taq酶;将V1基因与普通质粒经某种限制酶切割连接并成功导入大肠杆菌细胞后,发现仍有部分细胞不能表达出抗体2,最可能的原因是目的基因与质粒载体反向拼接。
(4)可用抗原-抗体杂交法检测受体细胞中是否真正成功表达了病毒S蛋白。