题目内容

【题目】牛奶富含多种氨基酸和矿物质,多饮用牛奶有利于增强体质,但牛奶消毒不好也容易携带细菌。为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况,做如图所示的操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1mL生牛奶稀释液至盛有9mL无菌水的试管中,混合均匀,如此再重复2次。请回答下列有关问题:

1)图中所示的操作方法为_____________。将牛奶进行梯度稀释的意义是_______________________

2)取最终的牛奶稀释液01mL滴在培养基上进行涂布,理想情况下,培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若设置了3个培养皿,菌落数分别为35个、33个、34个,则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为_____________个,运用这种方法统计的结果往往较实际值_____________(填“偏大”或“偏小”),原因是_______________________________________

3)从生牛奶取样培养得到的菌落中,混有各种杂菌,从中检测出大肠杆菌的方法是在培养基中加入_____________,具有_____________色且有金属光泽特征的菌落可以认定为大肠杆菌。

4)市售的牛奶中有部分是采用巴氏消毒法杀菌的,与煮沸消毒相比,巴氏消毒的牛奶在常温(约28℃)下保存时间较短,原因是____________________________________

【答案】稀释涂布平板法 使聚集在一起的微生物被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落 34×106 偏小 个别菌落可能是由2个或多个细菌形成的 伊红美蓝 (巴氏消毒的)牛奶中没有被杀死的微生物(细菌)在适宜温度(常温)下大量繁殖

【解析】

分析题图可知,图中所示操作为稀释涂布平板法,是对微生物活菌计数的常用方法。

1)图中所示的操作方法为稀释涂布平板法。将牛奶进行梯度稀释的意义是使聚集在一起的微生物被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落,便于计数。

23个培养皿中平均菌落数为(35+33+34÷3=34个,由题图可知牛奶稀释度为104则根据公式可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为34÷0.1×104=34×106个,由于个别菌落可能是由2个或多个细菌形成的,所以运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小。

3)鉴定大肠杆菌的方法是在培养基中加入伊红美蓝,具有黑色且有金属光泽特征的菌落可以认定为大肠杆菌。

4)由于巴氏消毒的牛奶中没有被杀死的微生物(细菌)在适宜温度(常温)下大量繁殖,所以与煮沸消毒相比,巴氏消毒的牛奶在常温(约28℃)下保存时间较短。

练习册系列答案
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【题目】回答下列(一)、(二)小题:

(一)回答与泡菜制作有关的问题:

(1)为了获得用于泡菜腌制的优良乳酸菌,通常将泡菜汁稀释后涂布在MRS乳酸菌专用培养基上进行________分离,然后将其扩大培养,并进行特性鉴定。在进行特性鉴定时,必需进行耐酸实验、耐高温实验和________实验等,从而选出优势菌株。下图是四个菌株在白菜汁培养基中的生长曲线,比较适合泡菜腌制的菌株是________

(2)在泡菜腌制过程中,会产生有机酸、醇类、亚硝酸盐等。腌制初期大量繁殖的微生物是________,醇类主要是由它进行________产生的,随后泡菜中PH开始下降,其它微生物生长受到抑制。

(3)为测定腌制的泡菜中亚硝酸盐含量,取腌制的泡菜和少量泡菜汤,在匀浆机中打成匀浆,过滤洗涤得到样品溶液,先除去蛋白质、脂质等,然后与对氨基苯磺酸发生重氮化反应,再与________偶联,形成紫红色产物,然后用光程1cm的比色杯测定光密度值。如果制作标准曲线时的比色杯光程大于样液的比色杯光程,测得的样液中亚硝酸盐含量________(偏大、偏小、无影响)。

(二)草甘膦是一种常用非选择性除草剂,一种农杆菌中的基因E编码抗草甘膦的酶,利用基因工程技术将基因E转入大豆中,以提高大豆对草甘膦的忍耐能力,请回答:

(1)从农杆菌中提取含有基因EDNA,用限制性核酸内切酶分别切割含基因EDNA和农杆菌的________,然后用DNA连接酶连接,形成重组DNA分子并导入农杆菌。为了提高重组DNA形成的效率,除了考虑目的基因和载体的质量与浓度外,还需要考虑的主要因素有________

(2)________后的大豆胚尖浸泡在含有E基因的农杆菌溶液中,一段时间后取出并转移到加有适当配比生长调节剂的培养基上,脱分化形成愈伤组织,为提高形成愈伤组织能力,可以对大豆胚尖进行适当的________刺激处理。

(3)除了用(2)中方法得到转基因大豆外,也可以将上述愈伤组织进行液体悬浮培养,分散成________丰富、液泡小而细胞核大的单细胞,这种单细胞依次经细胞团、球形胚、心形胚和________,最后再生出完整的植株。

(4)为判断本研究是否达到预期目的,可比较转基因大豆和非转基因大豆的________性状。

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