题目内容

【题目】为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题:

1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是_________________________;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入01mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为465147。据此可得出每升水样中的活菌数为___________

2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是_________________。若得到如图所示结果,在整个接种过程中,接种环至少需要烧灼________次。

3)示意图AB中,_______表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:________________________

【答案】检测培养基平板灭菌是否合格 48×107 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 4 B 振荡培养能提高培养液的溶解氧的含量;同时可以使菌体与培养液充分接触,提高营养物质的利用率

【解析】

分析图解:图中细菌的分离的方法为A表示稀释涂布平板法,B表示平板划线法。①稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后,均匀涂布在培养皿表面,经培养后可形成单个菌落。②平板划线法:将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板,接种,划线,在恒温箱里培养。在线的开始部分,微生物往往连在一起生长,随着线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形成单个菌落。

1)微生物培养过程应该进行无菌操作,配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌,可以将灭菌后的空白平板进行培养以检测培养基灭菌是否彻底;由题意知1mL水样中的菌落数是(46+51+47÷3÷0.1×100=4.8×104个,每升水样中的活菌数为4.8×104×103=4.8xl07/L

2)在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线的目的是将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落。接种前后接种环均需要进行灼烧灭菌,图中共划线3个区域,需要灼烧接种环4次。

3)图A示平板划线法的结果,图B示稀释涂布平板法接种培养的结果。

4)由于振荡培养提高了培养液中溶解氧的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高营养物质的利用率,因此细菌生长速度加快。

练习册系列答案
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【题目】水稻穗粒数可影响水稻产量。农杆菌Ti质粒上的T-DNA序列,可以从农杆菌中转移并随机插入到被侵染植物的核基因组中,导致被插入的基因功能丧失。研究者用此方法构建水稻突变体库,并从中筛选到穗粒数异常突变体进行了相关研究。

1)研究者分别用EcoR ⅠHind ⅢBamH Ⅰ三种限制酶处理突变体的总DNA,用Hind Ⅲ处理野生型的总DNA,处理后进行电泳,使长短不同的DNA片段______。电泳后的DNADNA分子探针(含放射性同位素标记的T-DNA片段)进行杂交,得到下图所示放射性检测结果。

①由于杂交结果中____________________________________________,表明T-DNA成功插入到水稻染色体基因组中。(注:T-DNA上没有EcoRⅠHind ⅢBamHⅠ三种限制酶的酶切位点)

②不同酶切结果,杂交带的位置不同,这是由于_____________________________________

③由实验结果断定突变体为T-DNA单个位点插入,依据是____________________________________

2)研究者用某种限制酶处理突变体的DNA(如下图所示),用__________将两端的黏性末端连接成环,以此为模板,再利用图中的引物__________组合进行PCR,扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列。经过与野生型水稻基因组序列比对,确定T-DNA插入了2号染色体上的B基因中。

3)研究发现,该突变体产量明显低于野生型,据此推测B基因可能_______(填促进抑制)水稻穗粒的形成。育种工作者希望利用B基因,对近缘高品质但穗粒数少的低产水稻品系2进行育种研究,以期提高其产量,下列思路最可行的一项是______

a.对水稻品系2进行60Co照射,选取性状优良植株

b.培育可以稳定遗传的转入B基因的水稻品系2植株

c.将此突变体与水稻品系2杂交,筛选具有优良性状的植株

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