题目内容
【题目】胃癌是我国发生率很高的一种恶性疾病,制备抑制胃癌细胞增殖的单克隆抗体对治疗胃癌具有重要意义。抗胃癌单克隆抗体制备过程如下图,回答下列问题:
(1)单克隆抗体制备的原理是______________和细胞增殖,图中注射的甲表示______________。
(2)与植物体细胞杂交过程相比,步骤①特有的处理方法是______________,步骤②常用特定的________培养基对乙进行筛选,使只有融合的杂种细胞才能生长。
(3)为筛选出丁,需将丙放入含有5%CO2的混合气体的培养箱中培养,其中CO2的主要作用是__________,然后通过检测细胞是否产生所需的______________,筛选出丁。
(4)步骤④中可以将丁在体外条件或小鼠腹腔中培养,然后从______________或______________中,提取出大量的单克隆抗体。
【答案】细胞膜的流动性 人的胃癌细胞 用灭活的病毒促融 选择 维持培养液的pH (专一)抗体 (细胞)培养液 (小鼠)腹水
【解析】
单克隆抗体制备流程:先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应,之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞;诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合,利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞;进行抗体检测,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞;进行克隆化培养,即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养;最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
(1)单克隆抗体制备过程中要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术,动物细胞培养的原理是细胞增殖,动物细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性。该过程中的目的是制备抑制胃癌细胞增殖的单克隆抗体,因此注射的甲表示人的胃癌细胞。
(2)诱导动物细胞融合,可用的诱导方法有物理法(离心、振动、电激)、化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒)。与植物体细胞杂交过程相比,步骤①诱导融合特有的处理方法是用灭活的病毒处理,步骤②为筛选杂交瘤细胞,常用特定的选择培养基对乙(融合后的细胞)进行筛选,使只有融合的杂种细胞才能生长。
(3)动物细胞培养需要一定的气体环境,包括95%的空气和5%CO2,其中CO2的主要作用是维持培养液的pH。通过检测细胞是否产生所需的(专一)抗体,筛选出能产生特异性抗体又能无限增殖的细胞丁。
(4)步骤④中可以将丁在体外条件或小鼠腹腔中培养,然后从(细胞)培养液或(小鼠)腹水中,提取出大量的单克隆抗体。
【题目】质壁分离法与小液流法均可测定植物叶片细胞的细胞液浓度。回答下列问题。
(1)质壁分离法:用一系列浓度梯度的蔗糖溶液观察细胞质壁分离现象,植物叶片细胞的细胞液浓度将介于____________之间。用打孔器取叶片时应避开大的叶脉,这属于对实验____________变量的控制。
(2)“小液流法”
实验原理:当把植物细胞放在溶液中时,两者便会发生水分交换。如果植物细胞的浓度高于溶液的浓度细胞吸水,使溶液浓度增大,比重也增大。若把此浸过细胞的溶液慢慢滴回同一浓度而未浸过细胞的溶液中。浸过细胞的溶液因比重大而往下沉。
实验步骤:
第一步:配制具有一定浓度梯度的蔗糖溶液。
第二步:取12支试管分成甲、乙两组,每组试管编号1~6号。向甲、乙两组相同编号的试管中加入相同浓度的蔗糖溶液,迅速塞紧试管。
第三步:取叶片60片,随机均分为6组,分别加人甲组的6支试管中,并塞紧试管。放置20min,期间多次播动试管。再向甲组每支试管中均加入微量甲烯蓝粉末(忽略对蔗糖浓度的影响)充分摇匀。
第四步:将乙组蔗糖溶液摇匀,用毛细吸管从甲组试管中吸取少量蓝色溶液,滴入乙组相同编号试管内的溶液中部(如下图)。观察蓝色小滴的升降情况,并做好记录。
实验结果:
乙组试管编号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
加入的蔗糖溶液浓度/mol·L-1 | 0.05 | 0.10 | 0.15 | 0.20 | 0.25 | 0.30 |
蓝色小滴升降情况 | ↓ | ↓ | ↓ | ↑ | ↑ | ↑ |
乙组试管4、5、6中蓝色小滴均上升,原因是________________________。取出甲组6支试管中的黑藻叶片进行显微观察,可发现试管____________中的黑藻叶片细胞内叶绿体分布最密集。根据实验结果可估测黑藻叶片细胞的细胞液浓度介于____________之间。