题目内容
【题目】（现代生物科技专题）
基因工程制药是制药行业突起的一支新军,自重组人胰岛素投放市场以来,利用转基因的工程菌生产的药物已有 60 多种。
（1）从人的胰岛 B 细胞中提取 mRNA，通过_____________获得_________________用于PCR 扩增。
（2）PCR 扩增可以在特定的仪器中加入模板 DNA、引物、____________以及_________等物质后自动完成。设计引物时需要避免引物之间形成_______________，而造成引物自连。
（3）利用大肠杆菌可以生产出人的胰岛素，________（填“可以”或“不可以”）用大肠杆菌直接生产人的糖蛋白，原因是_________________。
【答案】逆转录（反转录） cDNA dNTP（dATP、dTTP、dCTP、dGTP） Taq酶(热稳定DNA聚合酶) 碱基互补配对 不可以 大肠杆菌没有内质网和高尔基体，不能对表达的蛋白质进行加工修饰
【解析】
PCR技术：
1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。
2、原理：DNA复制。
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。
4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。
5、过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。
（1）从人的胰岛 B 细胞中提取 mRNA，可以以mRNA为模板通过逆转录方法获得cDNA，然后用于PCR扩增目的基因。
（2）PCR 扩增的条件需要：模板 DNA、引物、dNTP为原料、Taq酶等。设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对，而造成引物自连。
（3）大肠杆菌属于原核生物，细胞内没有内质网和高尔基体，而人的糖蛋白的合成和加工过程中需要内质网和高尔基体的加工与修饰作用，因此不可以用大肠杆菌直接生产出人的糖蛋白。
