Question

【题目】为探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化，某研究性学习小组按下表完成了有关实验。

试管编号	培养液/mL	无菌水/mL	酵母菌母液/mL	温度（℃）
A	10	-	0.1	20
B	10	-	0.1	5
C	-	10	0.1	20

（1）该实验探究的是_______________对酵母菌种群数量变化的影响。

（2）本实验中，某学生的部分实验操作过程如下：

①将A、B、C三支试管放置在表中相应的温度、其它条件适宜的环境中培养，第一天开始取样计数，连续七天； ②用无菌吸管从静置试管中吸取酵母菌培养液少许；

③加入血细胞计数板计数室，再盖上盖玻片，并用滤纸吸去多余菌液。

请纠正该同学实验操作中的两个错误。①________________________；②________________________。

（3）若吸取酵母菌样液1mL并稀释100倍，采用血细胞计数板（规格为1mm x lmm x 0．lmm，由400个小格组成）计数，下图表示一个中方格中酵母菌的分布情况，以该中方格为一个样方，计数结果是酵母菌有________个。如果计数的中方格酵母菌平均数为18个，则1mL培养液中酵母菌的总数为____________个。

Answer 1

【答案】营养、温度 取样前振荡试管 先盖上盖玻片，再加入血细胞计数板计数室 15 2．88×108

【解析】

酵母菌可以用液体培养基来培养，培养液中的酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、pH、温度等因素有关，可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线，从而掌握酵母菌种群数量的变化情况。利用血细胞计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，由于血细胞计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的，所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数目。

（1）根据题意和图表分析可知：实验自变量有培养液与无菌水、温度有20℃和5℃，所以该实验探究的是营养和温度对酵母菌种群数量变化的影响。

（2）①培养过程中，酵母菌可能会沉在试管底部，如果取样取的是试管底部，实验数据则会偏大，如果取样取的是试管上部，则实验数据则会偏小，因此制片前要轻轻震荡试管使酵母菌分布均匀。

②在制作临时装片，应先盖上盖玻片，然后沿着盖玻片的边缘滴一滴培养液，让培养液慢慢自行渗入血细胞计数板计数室。

（3）估算培养液中酵母菌种群密度的常用方法称为抽样检测法．酵母菌在计数时，计数原则为“计上不计下，计左不计右”，因此计数相邻两边，计数结果是酵母菌有15个．如果计数的中方格酵母菌平均数为18个，则1mL培养液中酵母菌的总数=18÷25×400×104×100=2.88×108个。