题目内容
【题目】科学家将人的生长激素基因与某种细菌(不含抗生素抗性基因)的DNA分子进行重组,并成功地在该细菌中得以表达(如下图)。请据图分析回答:
(1)过程①所示获取目的基因的方法是________。
(2)细菌是理想的受体细胞,这是因为它______________________________。
(3)质粒A与目的基因结合时,首先需要用__________酶将质粒切开“缺口”,然后用_______酶将质粒与目的基因“缝合”起来。
(4)若将细菌B先接种在含有__________的培养基上能生长,说明该细菌中已经导入外源质粒,但不能说明外源质粒是否成功插入目的基因;若将细菌B再重新接种在含有______________的培养基上不能生长,则说明细菌B中已经导入了插入目的基因的重组质粒。
(5)检测工程菌中的生长激素基因是否转录出mRNA和是否翻译出生长激素,可采用的技术分别是____________________、_____________________。
【答案】(1)反转录法(逆转录法)
(2)繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少
(3)限制性内切酶 DNA连接
(4)氨苄青霉素 四环素
(5)分子杂交 抗原—抗体杂交
【解析】(1)图中过程①是以RNA为模板,通过反转录法获取目的基因。(2)细菌具有繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少等优点,因此是基因工程中的理想的受体细胞。(3)构建基因表达载体时,需先用限制酶分别切割目的基因和载体,再用DNA连接酶将两者连接起来。(4)质粒A和重组质粒中都有完整的抗氨苄青霉素基因,因此细菌有氨苄青霉素抗性说明该细菌中已经导入外源质粒,但不能说明外源质粒是否成功插入目的基因;重组质粒中抗四环素基因内插入了目的基因,不能表达,因此细菌对四环素无抗性则说明细菌B中已经导入了插入目的基因的重组质粒。(5)检测mRNA和生长激素(蛋白质)的技术分别是分子杂交和抗原-抗体杂交。
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