题目内容
基因工程又叫基因拼接技术。
（1）在该技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的________为模板，________成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成________。
（2）基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌、________。若将真核基因在原核细胞中表达，对该目的基因的基本要求是________。
（3）假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制性内切酶切割运载体与目的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。连接产物至少有________种环状DNA分子，它们分别是________。
（1）信使RNA（mRNA） 逆转录（反转录） 双链DNA（目的基因）
（2）动植物细胞 除去内含子
（3）3 运载体自连的目的基因片段自连的运载体与目的基因片段相连的环状DNA分子
基因拼接技术一般要经过四个步骤：一是获取目的基因，二是目的基因与运载体结合，三是将目的基因导入受体细胞，四是目的基因的检测与表达。目的基因的获取主要有两种途径，一是从供体细胞的DNA中直接分离基因，二是人工合成基因。由于真核生物基因中有不表达的核苷酸序列（内含子），所以要想真核生物的基因在原核细胞中表达，就必须除去目的基因中的内含子。人工合成目的基因有两种方法：一是通过mRNA→单链DNA→双链DNA；二是根据蛋白质氨基酸序列→mRNA序列→推测出结构基因核苷酸序列→通过化学方法人工合成。常用的受体细胞有细菌、真菌和动植物细胞。常用的运载体有细菌的质粒、噬菌体和动植物病毒。当把切割后的运载体与目的基因放在一起，并加入DNA连接酶，将会出现3种环状的DNA分子。
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为模板， 成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成 。
分子，它们分别是 。（
，则EcoRI的识别序列和切点是_____________________（切点用箭头标在序列上）。