Question

【题目】培育具有抗除草剂性状的植物A的实验流程如下图所示。报告基因可以使细胞在特定情况下表达产物，易于检测、且不影响实验材料产生新的性状，质粒上的报告基因的产物能催化无色物质B呈现蓝色。请回答下列问题：

（1）常用___________处理农杆菌，促进重组表达载体转化到农杆菌细胞内。在筛选过程1中，用含有____________的培养基筛选成功导入重组表达载体的农杆菌。

（2）通过农杆菌转化法，______________基因会随T-DNA转移到植物A的染色体DNA上。

（3）为选出细胞内含转化后的农杆菌的愈伤组织，在筛选过程2中，还需要用______________________处理愈伤组织，挑选___________的愈伤组织继续培养成植株。

（4）对转基因植物A进行个体生物学水平鉴定的方法是__________________________________。

Answer 1

【答案】Ca2+（CaCl2） 氨苄青霉素 除草剂抗性基因和报告 无色物质B 呈现蓝色 喷洒一定量或适量的除草剂，观察植株是否存活

【解析】

图中构建的基因表达载体在筛选1时需要在培养基中加入氨苄青霉素以筛选成功导入表达载体的农杆菌；利用农杆菌感染法将表达载体导入受体细胞，由于“报告基因”编码的蛋白质能催化无色物质B呈现蓝色，所以图中筛选2时需要用无色物质B处理愈伤组织，以筛选出呈现蓝色的组织。

（1）为提高表达载体进入农杆菌的效率需要用Ca2+处理细胞，使之成为感受态的细胞，易于吸收重组质粒。氨苄青霉素抗性基因作为标记基因，鉴别并筛选含有目的基因的细胞，含氨苄青霉素的培养基能将成功导入表达载体的农杆菌筛选出来，所以，在筛选过程1中，用含有氨苄青霉素的培养基筛选成功导入重组表达载体的农杆菌。

（2）由图所示，报告基因和目的基因即除草剂抗性基因位于基因表达载体质粒的T—DNA上，所以，通过农杆菌转化法，除草剂抗性基因和报告基因会随T-DNA转移到植物A的染色体DNA上。

（3）根据题意可知，报告基因的产物能催化无色物质B呈现蓝色，因此筛选2需要用无色物质B处理愈伤组织并筛选出呈现蓝色的组织。

（4）对于转基因植物A，如果目的基因成功表达则其具有抗除草剂特性，因此，对转基因植物A进行个体生物学水平鉴定的方法是喷洒一定量或适量的除草剂，观察植株是否存活。