题目内容
【题目】根据基因工程的有关知识。回答下列问题。
（1）大肠杆菌质粒常作为基因工程目的基因的载体，另外，_____和______也可作为载体，若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是_________________________。在基因工程中，常用Ca2+处理大肠杆菌，其目的是_______________________________________________。
（2）利用转基因技术实现胰岛素的批量生产是目前治疗糖尿病的新思路，该过程中的关键操作环节是____________________________。
（3）对于胰岛素基因的获取，途径之一是通过提取_____________细胞中的胰岛素mRNA，经过____________过程合成，之后通过_____________技术大量扩增。
【答案】λ噬菌体的衍生物 动植物病毒 未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱 提高受体细胞的转化率（使之成为感受态细胞，有利于其吸收重组DNA分子） 基因表达载体的构建 胰岛B 反转录 PCR
【解析】
本题以信息给予的形式考查基因工程中基因表达载体的类型及构建、获取目的基因的方法、PCR技术等知识点，做题时关键要掌握基因工程操作的基本步骤，把目的基因导入受体细胞的方法等，结合所学的基因工程的知识准确作答。
（1）在基因工程中使用的运载体除质粒外，还有 λ噬菌体的衍生物和动植物病毒，若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，由于未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱，所以不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞。常用Ca2+处理大肠杆菌使大肠杆菌，使之处于感受态，有利于其吸收重组DNA分子，即易于目的基因的导入。
（2）基因工程的操作步骤：1、获取目的基因（从基因组文库中获取或、利用PCR技术扩增目的基因）；2、基因表达载体的构建（这也是基因工程的核心）；3、将目的基因导入受体细胞（植物、动物、微生物）；4、目的基因的检测与鉴定 （DNA分子杂交技术、抗原抗体杂交技术），其中基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，因此利用转基因技术实现胰岛素的批量生产是目前治疗糖尿病的新思路，该过程中的关键操作环节是基因表达载体的构建。
（3）胰岛素基因只在胰岛B细胞中才表达，需要从人体相应的胰岛B细胞中提取mRNA，再用反转录的方法获得人胰岛素基因，之后通过PCR技术大量扩增。
