Question

【题目】据英国每日邮报报道，科研人员偶然筛选出一种可以“吃塑料”的细菌（F6菌），它能够在30℃下经过6个星期完全降解PET（聚对苯二甲酸乙二醇酯）薄膜。进一步研究发现，这种细菌以PET作为碳源，其中ISF6酶在降解过程中起着决定性的作用。请回答下列问题：

（1）根据报道信息可知，要筛选出F6菌，必须配制以______________作为唯一碳源的固体培养基，该选择培养基中应添加____________________________以使其呈固态，在培养基各成分溶化后分装前，应进行__________________和灭菌。

（2）为保证培养基上能均匀地生长出一层F6菌，首先需要用_______________对样液进行梯度稀释，然后取不同稀释度的样品各0. 1mL涂布到固体培养基上，将平板_____________后放入恒温箱培养。PET粉末呈白色，不溶于水。F6菌将PET降解后，高效降解PET的F6菌菌落周围会出现__________________。若接种24h后发现某个培养基上没有任何菌落生长，则最可能的原因是___________________________________。

（3）实验结束后，使用过的培养基应该进行______________处理后，才能扔掉。

Answer 1

【答案】PET（或聚对苯二甲酸乙二醇酯） 琼脂（等凝固剂） 调节pH 无菌水 倒置 大的透明圈 涂布器灼烧后未冷却就用于涂布，杀死了菌种 灭菌

【解析】

培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。培养基的分类：①按物理性质分，分为液体培养基和固体培养基，固体培养基中含有凝固剂，一般是琼脂；②按化学成分分，分为天然培养基和合成培养，两者的区别是天然培养基成分不确定，合成培养基成分的含量是确定的；③按用途分，分为选择培养基和鉴别培养基。选择培养基主要是培养、分离特定的微生物，培养酵母菌可在培养基中加入青霉素；鉴别培养基可以鉴定不同的微生物，比如鉴别饮用水中是否含有大肠杆菌，可以用伊红美蓝培养基，如果菌落呈深紫色，并带有金属光泽，说明有大肠杆菌。

(1) 由于“吃塑料”的细菌使用PET作为能量源，故该固体培养基应以PET作为唯一能量源。制备固体培养基需添加琼脂等凝固剂。在培养基各成分溶化后分装前，应该先调pH再灭菌。

（2）稀释涂布平板法需要用无菌水对样液进行梯度稀释，培养细菌时，需将平板倒置以防止培养皿盖上形成的水珠滴落在培养基上污染培养基。这种细菌将PET降解后，含有该指示剂的培养基中会出现以这种细菌为中心的透明圈。在稀释涂布平板法过程中，若涂布器灼烧后未冷却就用于涂布，能杀死菌种，使得培养基上没有任何菌落生长。

（3）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理，防止污染环境和实验者本身。