题目内容
【题目】人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值,只能从血浆中制备。如图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。请回答:
(1)获取HSA基因的方法有______________、_____________、_____________。若需要获得cDNA则首先需采集人的血液,提取血液中的_________。然后以cDNA为模板,采用PCR技术扩增HSA基因。
(2)下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向,请用箭头在方框内标出标出另一条引物的位置及扩增方向。
______________
(3)启动子通常具有物种及组织特异性,构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体,需要选择的启动子是_____________(填写字母)。
A.人血细胞启动子 B.水稻胚乳细胞启动子 C.大肠杆菌启动子 D.农杆菌启动子
(4)利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质,其目的是_______________。农杆菌中含有Ti质粒,其上有一段TDNA,这段DNA的作用是_______________________。
(5)为证明rHSA具有医用价值,须确认rHSA与______________的生物学功能一致。
【答案】从基因文库中获取 PCR技术扩增 人工合成 RNA(或mRNA) B 吸引农杆菌移向水稻受体细胞,有利于目的基因成功转化 将目的基因转移到受体细胞,并整合到受体细胞染色体DNA上 HSA
【解析】
基因工程的操作步骤:获取目的基因(基因文库、PCR、人工合成);构建基因表达载体(含标记基因、启动子、终止子、目的基因、复制原点等);把目的基因导入受体细胞(显微注射法、农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法、钙离子处理法);目的基因的检测和鉴定(分子水平和个体水平检测,前者包括DNA分子杂交、分子杂交和抗原抗体杂交;后者如抗虫抗病接种实验)。
(1)获取HSA基因可以通过从基因文库获取、PCR扩增、人工合成等方法获取HSA基因。HSA只能在血浆中制备,故若需要获得cDNA,则需要先提取血液中的RNA,通过反转录合成cDNA,再采用PCR技术扩增HSA基因。
(2)根据两条链反向平行可知,另一条引物的结合位点应该在下面一条链的右侧,即。
(3)要让目的基因在水稻的胚乳细胞中表达,需要在目的基因的前面加上水稻胚乳细胞基因的启动子。
综上所述,ACD不符合题意,B符合题意。
故选B。
(4)常用农杆菌转化法将目的基因导入水稻细胞中,酚类物质吸引农杆菌移向水稻受体细胞,有利于目的基因成功转化。农杆菌中含有Ti质粒,其上有一段T-DNA,将目的基因转移到受体细胞,并整合到受体细胞染色体DNA上,故需要将目的基因插入到T-DNA上。
(5)rHSA是通过基因工程技术获得的,可以通过比较rHSA与HSA的生物学功能是否一致,来确定rHSA的医学价值。
【题目】下表是外源基因插入位置(插入点有a、b、c),请根据表中提供细菌的生长情况,推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点,正确的一组是:
细菌在含青霉素 | 细菌在含四环素 | |
① | 能生长 | 能生长 |
② | 能生长 | 不能生长 |
③ | 不能生长 | 能生长 |
A.①是c;②是b;③是aB.①是a和b;②是a;③是b
C.①是a和b;②是b;③是aD.①是c;②是a;③是b