Question

【题目】苯酚具有很强的毒性，有致畸、致癌和致突变作用。选育苯酚分解菌用于降解工业废水中的苯酚具有重要意义。请回答:

（1）从富含苯酚的土壤中分离苯酚分解菌时，培养基应以为苯酚为唯一碳源，原因是_______________________________________________________。

（2）苯酚分解菌为多种细菌，若在分离苯酚分解菌的同时对其计数，可用 _________法将菌液接种在培养基上。通过观察培养基上的___________________结合显微镜下的菌体观察完成对苯酚分解菌的菌种鉴定。

（3）研究表明分解苯酚的关键酶苯酚羟化酶，它在细菌细胞内的 ________上合成，属于___________填“胞内酶”或“胞外酶”)。

（4）苯酚分解菌的固定化常用包埋法。若用海藻酸钠溶液固定苯酚分解菌时，形成的胶粒球度不良出现拖尾，可能的原因是__________________________。与直接使用苯酚分解菌相比，使用固定化苯酚分解菌__________________的优点。

Answer 1

【答案】只有以苯酚为唯一碳源的微生物才可以在这种选择培养基上存活 稀释涂布平板 菌落特征 核糖体 胞内酶 海藻酸钠溶液浓度过高 能重复利用，降低成本

【解析】

选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。

微生物的计数方法：血细胞计数法、稀释涂布平板法、比浊法等。

（1）在以苯酚为唯一碳源的培养基中，只有以苯酚为唯一碳源的微生物才可以存活，其他微生物因缺少碳源而无法存活，故从富含苯酚的土壤中分离苯酚分解菌时，培养基应以为苯酚为唯一碳源。

（2）稀释涂布平板法是常用的微生物计数方法，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。因此，可用稀释涂布平板法将菌液接种在培养基上，既可分离苯酚分解菌，也可对其计数。菌落特征是菌种鉴定的重要依据之一，可通过观察培养基上的菌落特征，结合显微镜下的菌体观察完成对苯酚分解菌的菌种鉴定。

（3）苯酚羟化酶是在细菌细胞内的核糖体上合成。由于细菌没有内质网和高尔基体，不能对苯酚羟化酶进行加工、运输和分泌，所以苯酚羟化酶属于胞内酶。

（4）海藻酸钠溶液浓度过低会使凝胶珠颜色过浅、呈白色，溶液浓度过高会使凝胶珠不是圆形或是椭圆形。与直接使用苯酚分解菌相比，使用固定化苯酚分解菌具有重复利用，降低成本的优点。