Question

【题目】如图是利用转基因技术培育抗病小麦的过程。请据图回答问题：

（1）在步骤⑤⑥中都需用_____________处理。为了确认目的基因通过⑦导入植物细胞后是否转录，通常采用_____________法进行检测；验证目的基因导入受体细胞后是否成功表达，通常采用__________法从分子水平进行检测。

（2）重组质粒T除含有目的基因外，还必须有_____________、_____________和_____________等。

（3）图示中将基因表达载体构建完成后没有直接导入农杆菌，而是先将其导入大肠杆菌，目的是_______。

（4）假设该抗病基因D，通过基因工程导入小麦后连接到小麦的一条染色体上，则该小表进行减数分裂的细胞在联会时有_____________个D基因。

Answer 1

【答案】 Ca2+ 分子杂交 抗原-抗体杂交 启动子 终止子 标记基因 获取大量重组质粒（让目的基因扩增） 2

【解析】试题分析：步骤①~⑦分别是逆转录、PCR技术、酶切质粒、构建重组质粒、将重组质粒导入大肠杆菌扩增重组质粒、将重组质粒导入农杆菌、利用农杆菌转化法培育抗病小麦新植株。重组质粒包括启动子、终止子、标记基因、目的基因。将重组质粒导入原核生物，需先用Ca2+处理使之处于感受态。检测目的基因是否整合到受体细胞的染色体DNA上，可采用DNA分子杂交法，检测目的基因是否转录出mRNA，可采用核酸分子杂交法，检测目的基因是否翻译出蛋白质，可采用抗原-抗体杂交法。

（1）步骤⑤⑥分别是将重组质粒导入大肠杆菌、农杆菌，需用Ca2+处理使之处于感受态，能够从溶液中吸收重组质粒。检测目的基因是否转录，通常采用分子杂交法，若转录，则出现杂交带；目的基因是否成功表达出相应蛋白质，通常采用抗原-抗体杂交法，若表达成功，则出现杂交带。（2）重组质粒包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等。（3）在将基因表达载体导入农杆菌前，将目的基因导入大肠杆菌的目的是扩增目的基因，增加目的基因的数量。（4）减数第一次分裂前的间期，DNA复制和有关蛋白质的合成，所以联会时DNA已完成复制，此时细胞中有2个D基因。