题目内容
【题目】如图是利用转基因技术培育抗病小麦的过程。请据图回答问题:
(1)在步骤⑤⑥中都需用_____________处理。为了确认目的基因通过⑦导入植物细胞后是否转录,通常采用_____________法进行检测;验证目的基因导入受体细胞后是否成功表达,通常采用__________法从分子水平进行检测。
(2)重组质粒T除含有目的基因外,还必须有_____________、_____________和_____________等。
(3)图示中将基因表达载体构建完成后没有直接导入农杆菌,而是先将其导入大肠杆菌,目的是_______。
(4)假设该抗病基因D,通过基因工程导入小麦后连接到小麦的一条染色体上,则该小表进行减数分裂的细胞在联会时有_____________个D基因。
【答案】 Ca2+ 分子杂交 抗原-抗体杂交 启动子 终止子 标记基因 获取大量重组质粒(让目的基因扩增) 2
【解析】试题分析:步骤①~⑦分别是逆转录、PCR技术、酶切质粒、构建重组质粒、将重组质粒导入大肠杆菌扩增重组质粒、将重组质粒导入农杆菌、利用农杆菌转化法培育抗病小麦新植株。重组质粒包括启动子、终止子、标记基因、目的基因。将重组质粒导入原核生物,需先用Ca2+处理使之处于感受态。检测目的基因是否整合到受体细胞的染色体DNA上,可采用DNA分子杂交法,检测目的基因是否转录出mRNA,可采用核酸分子杂交法,检测目的基因是否翻译出蛋白质,可采用抗原-抗体杂交法。
(1)步骤⑤⑥分别是将重组质粒导入大肠杆菌、农杆菌,需用Ca2+处理使之处于感受态,能够从溶液中吸收重组质粒。检测目的基因是否转录,通常采用分子杂交法,若转录,则出现杂交带;目的基因是否成功表达出相应蛋白质,通常采用抗原-抗体杂交法,若表达成功,则出现杂交带。(2)重组质粒包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等。(3)在将基因表达载体导入农杆菌前,将目的基因导入大肠杆菌的目的是扩增目的基因,增加目的基因的数量。(4)减数第一次分裂前的间期,DNA复制和有关蛋白质的合成,所以联会时DNA已完成复制,此时细胞中有2个D基因。