题目内容

【题目】普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因GhMnaA2,能在纤维细胞中特异性表达,产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素降解,棉纤维长度变短。为了培育新的棉花品种,科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体,利用农杆菌转化法导入棉花细胞,成功获得转基因棉花品种,具体过程如下。请分析回答:

1过程中所用的限制性内切酶分别是

2基因表达载体除了图示组成外,还应有 至少答两个

3过程中用酶切法可鉴定正、反义表达载体。用Sma酶和Not酶切正义基因表达载体获得005kb、325kb、595kb、945kb四种长度的DNA片段,则用Not酶切反义基因表达载体获得DNA片段的长度应是

4过程中利用农杆菌介导转化棉花细胞的过程中,整合到棉花细胞染色体DNA的区段是 ,转化后的细胞再通过形成植物体。

5导入细胞内的反义GhMnaA2转录的mRNA能与细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对,从而 促进或抑制基因的表达,其意义是

【答案】1Hind、BamH Sma 2复制原点、终止子、标记基因等 360kb、127kb 4)(含有E6启动子和GhMnaA2基因的T-DNA 5抑制 阻止β-甘露糖苷酶合成,使棉纤维更长其它合理答案也可

【解析】1根据图示,中所用的限制性内切酶是Hind、BamH中所用的限制性内切酶是Sma2基因表达载体组成包括目的基因、启动子、终止子、复制原点和标记基因等。3根据图示,正、反义基因表达载体总长度相等,Not酶切位点在目的基因中的位置不一样,因此只用Not酶切反义基因表达载体获得DNA片段的长度应是595+005=60kb,945+325=127kb。4过程中利用农杆菌介导转化棉花细胞的过程中,整合到棉花细胞染色体DNA的区段是含有E6启动子和GhMnaA2基因的可移动的TDNA片段。5因为在普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因GhMnaA2,能在纤维细胞中特异性表达,产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素降解,棉纤维长度变短。而导入细胞内的反义GhMnaA2转录的mRNA能与棉花细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对,从而抑制基因的表达,其意义是阻止β-甘露糖苷酶合成,使棉纤维更长。

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