题目内容
【题目】北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。如图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，据图回答下列问题：
(1)图中的①是通过 ________________方法获取了目的基因，图中的②过程需要用到的酶是________________和DNA连接酶。
(2)下列不能说明目的基因已成功导入受体细胞的是________。
A．检测受体细胞是否有质粒
B．检测受体细胞是否含有目的基因
C．检测受体细胞是否含有目的基因的表达产物
D．检测受体细胞是否含有目的基因转录出的mRNA
(3)成功导入了重组质粒的番茄组织块在愈伤组织形成后，将含有愈伤组织培养物的试管放在 ________上，通过 __________培养可以分散成胚性细胞。
(4)为了检测抗冻番茄植株是否成功培育，应将该植株放在__________环境中培养。
【答案】 化学(人工)合成 限制性核酸内切酶 A 摇床 液体悬浮 低温(寒冷)
【解析】试题分析：本题以图文结合的形式综合考查学生对基因工程的知识的识记和理解能力。解答本题需熟记并理解基因工程的基本操作程序并形成清晰的知识网络。在此基础上，结合问题情境，从题图和题意中提取有效信息进行相关问题的解答，并与植物组织培养技术建立联系。
(1)图中的①是借助逆转录的原理通过化学(人工)合成方法获取了目的基因，图中的②过程是基因表达载体的构建，需要用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶。
(2)质粒中不含有目的基因，因此检测受体细胞是否有质粒，不能说明目的基因已成功导入受体细胞，A项正确；目的基因导入受体细胞后可在受体细胞中表达，所以，若目的基因已成功导入受体细胞，则在受体细胞内会检测出目的基因，也可能检测出目的基因转录出的mRNA或目的基因的表达产物，B、C、D三项均错误。
(3) 成功导入了重组质粒的番茄组织块在愈伤组织形成后，将含有愈伤组织培养物的试管放在摇床上，通过液体悬浮培养可以分散成胚性细胞。
(4) 为了检测抗冻番茄植株是否成功培育，应将该植株放在低温(寒冷) 环境中培养,若该植株正常生长繁殖，则表明抗冻番茄植株培育成功。
