题目内容
【题目】我国国产的转基因抗虫棉种植面积已经超过抗虫棉种植面积的95%。将抗虫基因导入棉花细胞的方法主要是农杆菌转化法，以下相关操作及结果的叙述，错误的是（ ）
A.需用相同的限制酶切割Bt毒蛋白基因和农杆菌的Ti质粒
B.限制酶和DNA连接酶分别催化磷酸二酯键的水解和形成
C.用放射性同位素标记的Bt毒蛋白基因作探针检测抗虫基因导入是否成功
D.抗虫基因转移至受体细胞染色体DNA上获得抗虫棉属于染色体变异
【答案】D
【解析】
基因工程是指按照人类的愿望，将不同生物的遗传物质在体外人工剪切并和载体重组后转入细胞内进行扩增，并表达产生所需蛋白质的技术。基因工程的原理是基因重组；基因工程的优点是能够打破种属的界限，在基因水平上改变生物遗传性，并通过工程化为人类提供有用产品及服务。
基因工程的工具有：限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体。需要限制酶来切割以获取目的基因，同时需要相同的限制酶切割运载体以获取与目的基因相同的黏性末端，再通过DNA连接酶连接目的基因和运载体。
目的基因的检测与鉴定：（1）在分子水平上的检测方法：①DNA分子杂交法，用标记的目的基因做探针，检测待测细胞内的DNA分子中是否插入了目的基因；②分子杂交法，利用标记的目的基因做探针，检测待测细胞内的mRNA中是否存在目的基因转录的产物；③抗原-抗体杂交法，检测待测细胞内是否有目的基因翻译的产物蛋白质存在。（2）个体水平上的鉴定：根据目的基因表达产物的特殊性质进行鉴定，如接种性抗虫、抗病实验等。
A、基因表达载体的构建方法是先用同种限制酶切割载体和含目的基因的DNA分子，以产生相同的末端，再用DNA连接酶进行连接，A正确；
B、限制酶和DNA连接酶分别催化磷酸二酯键的水解和形成，B正确；
C、用放射性同位素标记的Bt毒蛋白基因作探针利用DNA分子杂交技术检测抗虫基因导入是否成功，C正确；
D、抗虫基因转移至受体细胞染色体DNA上获得抗虫棉属于基因重组，D错误。
故选D。
