题目内容
【题目】国家863计划项目“利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用蛋白”取得重大进展。 目前，已经成功获得经纯化的抗凝血酶Ⅲ蛋白，达到国际先进水平。下面是制作崂山奶山羊乳腺生物反应器的流程图，回答相关问题。
（1）与崂山奶山羊相比，一般不选用小鼠作为乳腺生物反应器的主要原因是__________________。
（2）PCR扩增抗凝血酶Ⅲ基因时，复性时冷却温度的设定是成功的关键，因为温度过高会破坏 _____之间相应碱基的配对。过程③为________________，此过程需将该药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，目的是______________________________________________。
（3）过程①需将重组质粒注入受精卵内，而不是动物体细胞内，其原因是_______________________。
（4）在进行过程⑤之前，需取囊胚期的___________细胞做性别鉴定；随后对筛选的胚胎进行分割获得同卵双胎。胚胎分割时，要将囊胚的内细胞团均等分割的原因是 ______________________________。
【答案】小鼠产奶量少 两种引物分别于两条模板链 基因表达载体的构建 使目的基因在乳腺细胞中特异性表达 体细胞分化程度高，恢复全能性十分困难 滋养层 防止影响分割后胚胎的恢复和进一步发育
【解析】
图示是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用蛋白的流程图，其中①表示卵细胞的采集和培养，②表示精子的采集和获取，③表示基因表达载体的构建，④表示将目的基因导入受体细胞，⑤表示胚胎移植。
（1）该工程的目的是“利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用蛋白”，因此相比较于山羊，小鼠的产奶量很少；
（2）氢键受热易分解，在PCR扩增抗凝血酶Ⅲ基因时，需要将引物加到两条模板链上，温度过高会破坏两种引物分别于两条模板链的碱基对；③将目的基因与质粒重组，因此属于基因表达载体的构建；将该药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起可以使目的基因在乳腺细胞中特异性表达；
（3）相比较于动物体细胞，受精卵的全能性更强，体细胞的化程度高，恢复全能性十分困难；
（4）在进行胚胎移植之前，若要进行性别鉴定，可以取囊胚期的滋养层细胞进行检测；在胚胎分割时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
