题目内容
绿色荧光蛋白GFP能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：
（1）若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—，在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点，在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来__________，理由是： ___________________________________________。
（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多的方法是______________________。
（3）获得转基因猪的关键步骤是_____（填序号），GFP基因的作用是作为_______。抑制小猪抗原表达的基因要插入到启动子和_________之间。获得的转基因克隆猪，可以解决的医学难题是可以避免 _____________________。
（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：_____________________（用数字表示）。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）
④表达出蓝色荧光蛋白。
（1）可以连接(1分) 因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互补的）
（2）显微注射技术
（3）② 作为标记基因 终止子 器官移植时发生免疫排斥反应
（4）②①③④
(6分)2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白(GFP)会发出绿色荧光，可借助荧光跟踪蛋白质在细胞
内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程：
请根据上述材料回答下列问题：
(1)在某种生物中检测不到绿色荧光，将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光。由此可知（ ）
| A．该生物的基因型是杂合的 |
| B．该生物与水母有很近的亲缘关系 |
| C．绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表达 |
| D．改变绿色荧光蛋白基因的1个核苷酸对，就不能检测到绿色荧光 |
(3) 上图操作流程中用到的工具酶有________。
(4) 为迅速增加绿色荧光小鼠的数量，可采用胚胎工程技术有超数排卵受精， 、 。 
蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：
色体DNA上。
的正确顺序是：＿＿＿＿＿＿(用数字表示)。