Question

【题目】纤维素是一种能生物降解的可再生的能源物质，牛的瘤胃中生活有纤维素分解菌，从而牛能利用纤维素。某小组从牛粪便中筛选出能够降解纤维素的菌株，并对纤维素酶进行测定，流程如下图所示。请回答下列问题：

（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶至少包括三种组分，其中葡萄糖苷酶能将______。

（2）牛粪便样品通过富集培养可增加_________，以确保能从样品中分离得到目的菌。

（3）将富集培养后的牛粪便混合菌液适当稀释后涂布在以________作为唯一碳源的选择培养基上，放入培养箱中培养。培养完成后滴加______染色，观察培养基上是否产生_________，再通过比较其大小，初步获得目的菌株。从稀释倍数为103的试管中吸取0.1mL样液涂布到平板上，培养后发现平板上菌落过于密集，最可能的原因是_________。

（4）测定纤维素酶时，一般采用的方法是_______________ 。

Answer 1

【答案】纤维二糖分解成葡萄糖 纤维素分解菌的浓度 纤维素 刚果红 透明圈 样液中细菌浓度较高，稀释倍数不够 滤纸分解实验（对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定）

【解析】

分离中纤维素分解菌的实验流程是:取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落。纤维素分解菌可以产生纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖供微生物利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中进行选择培养，选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，该培养基上其他微生物则不能生长。在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。挑取菌落，用平板划线法或稀释涂布平板法分别接种到固体培养基上培养，进一步分离纯化得到单菌落。

（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶至少包括三种组分，C1酶、Cx酶以及葡萄糖苷酶，其中葡萄糖苷酶能将纤维二糖分解成葡萄糖。

（2）牛粪便样品通过富集培养可增加纤维素分解菌的浓度，以确保能从样品中分离得到目的菌。

（3）将富集培养后的牛粪便混合菌液适当稀释后涂布在以纤维素作为唯一碳源的选择培养基上，放入培养箱中培养。培养完成后滴加刚果红染色，观察培养基上是否产生透明圈，再通过比较其大小，初步获得目的菌株。从稀释倍数为103的试管中吸取0.1mL样液涂布到平板上，培养后发现平板上菌落过于密集，最可能的原因是样液中细菌浓度较高，稀释倍数不够。

（4）测定纤维素酶时，一般采用的方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。