题目内容
【题目】常见的酿酒酵母能利用葡萄糖，不能利用木糖发酵。若用转基因技术将发酵木糖的关键基因——木糖还原酶（XYL1）或木糖异构酶基因（XYLA）转入酿酒酵母中，均能培育出能利用木糖发酵产生酒精的酿酒酵母。图表示XYL1基因与细菌pYMILP质粒重组的过程示意图。图中AMPr是氨苄青霉素抗性基因，其基因产物可使“碘—淀粉”复合物脱色，从而在含有“碘—淀粉”的固体平板上形成透明圈。转化成功的酿酒酵母中含AMPr基因的重组质粒拷贝数越多，透明圈越大。
（1）据图可知，目的基因的长度是________________bp；图中获取目的基因和切割质粒所用的限制性核酸内切酶分别是___________、__________，最终能形成重组质粒的原因是________________。
（2）图是四个成功导入重组质粒的酵母菌的菌株（品系），在“碘—淀粉”的固体平板上的生长情况，其中目的基因表达量最高的是________，根据题意，分析原因是_____________________。此“碘—淀粉”培养基从功能上看属于_____________培养基。
（3）图是不同温度条件下重组酿酒酵母菌株的木糖异构酶活性。据图推测，此酶最初来自于（_______）
A．嗜热细菌 B．大肠杆菌 C．葡萄球菌 D．乳酸杆
【答案】973bp BamHI BglⅡ 两种酶切后具有相同的粘性末端 2 透明圈越大说明含AMPr 基因的重组质粒拷贝数越多，目的基因数量就越多，表达量越高 选择 A
【解析】
基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型的生物产品；由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。基因工程的基本工具包括限制性核酸内切酶、DNA连接酶以及运载体等；基因工程的步骤包括目的基因的获取（从基因文库中获取目的基因、利用PCR技术扩增目的基因以及化学方法人工合成）、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定。
（1）据图分析，质粒的长度是9117bp，重组质粒的长度是10090bp，所以目的基因的长度是10090-9117=973bp；图中显示获取目的基因和切割质粒所用的限制性核酸内切酶分别是BamHI和BglⅡ，目的基因可以与质粒连接形成重组质粒，说明两种不同的限制性内切酶切割以后，可以形成相同的粘性末端。
（2）转化成功的酿酒酵母中含AMPr基因的重组质粒拷贝数越多，目的基因数量就越多，表达量越高，则透明圈越大，所以2号目的基因的表达量最高；“碘-淀粉”培养基从功能上看属于选择培养基。
（3）由图可以看出，木糖异构酶活性的最适温度大于80℃，温度较高，说明该酶最初来自嗜热细菌，故选A。
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