题目内容
【题目】某研究小组进行了甲型H1N1流感病毒的疫苗研制工作，如图为他们前期研究工作的简要操作流程图：
(1)实验步骤①所代表的反应过程是________；在步骤②之间扩增H基因常采用的方法是___________。
(2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用的酶是____________。
(3)构建重组表达载体时，一般需要将H基因与载体结合，常用作基因工程载体的是________；在检测受体细胞中是否已经导入目的基因时，常常要借助载体上________的表达。
【答案】逆转录 PCR(或多聚酶链式反应)技术 限制性核酸内切酶和DNA连接酶 质粒(或病毒) 标记基因(或抗生素抗性基因)
【解析】
基因工程：按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状；基因工程的步骤：①提取目的基因，②目的基因与运载体结合（形成重组DNA分子），③将重组DNA分子导入受体细胞，④目的基因的表达与检测；基因工程技术的关键是构建基因表达载体，它使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以传给下一代，同时使目的基因表达并发挥作用；基因工程中限制性核酸内切酶和DNA连接酶是构建重组质粒必需的工具酶。
（1）实验步骤①RNA→DNA所代表的反应过程是逆转录；在步骤②之前扩增H基因常采用的方法是PCR技术(或多聚酶链式反应技术)；
（2）需要限制酶来切割以获取目的基因，同时需要相同的限制酶切割运载体以获取与目的基因相同的黏性末端，再通过DNA连接酶连接目的基因和运载体，故步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用的酶是限制酶(限制性内切酶)和DNNA连接酶；
（3）构建重组表达载体时，一般需要将H基因与载体结合，常用做基因工程载体的是质粒(或病毒)；在检测受体细胞中是否已经导入目的基因时，常常要借助载体上标记基因(或抗生素抗性基因)的表达。
