题目内容
【题目】利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术。2005年我省青岛“崂山奶山羊乳腺生物反应器研制”项目通过鉴定，该项目产生的药用蛋白具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点，可产生
—干扰乙、乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等医药产品，造福人类健康。请根据这一科技成果的研究过程回答问题：
（1）在研究过程中，研究人员首先从相关基因组中获取了目的基因，并采用_________技术对目的基因进行扩增，然后将目的基因与质粒等载体组合形成了重组载体。在繁育“乳腺生物反应器”时，要将药用蛋白基因与___________启动子结合在一起，通过_______________等方法导入哺乳动物的________中，经胚胎早期培养一段时间后移入受体。
（2）若研究人员已将重组载体成功导入多个体外培养的受精卵中，并发育成了早期胚胎，要想获得转基因山羊，应进一步采取的技术手段是_____________________________________。此时的早期胚胎需将受精卵培养至_________________期，培养液的成分包括无机盐、有机盐、维生素、激素、_________以及血清等物质。
（3）由于转基因表达产物存在于山羊的乳汁中，因此在胚胎时期要对胚胎进行________鉴定。该工程技术最终获得成功的标志是_______________________________________。
【答案】PCR（聚合酶链式反应） 乳腺蛋白基因 显微注射 受精卵 胚胎移植 桑椹胚或囊胚 氨基酸、核苷酸 性别 从崂山羊乳汁中获得了—干扰素、乙肝表面抗原和抗凝血酶Ⅲ等产物（或从崂山奶山羊乳腺中获得了转基因产物）
【解析】
1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
2、动物细胞培养的条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物；
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质；
（3）温度和pH；
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（CO2的作用是维持培养液的pH）。
（1）目的基因的扩增需要采用PCR技术，在繁育“乳腺生物反应器”时，要将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因启动子结合在一起，通过显微注射法等方法导入哺乳动物的受精卵中，经胚胎早期培养一段时间后移入受体。
（2）将早期胚胎培育成转基因山羊，需要采取胚胎移植技术，需要将受精卵培养至桑椹胚或囊胚，培养液中还需要氨基酸和核苷酸。
（3）在培养转基因动物中，需要在胚胎时期进行性别鉴定。技术成功的标志是从崂山羊乳汁中获得了—干扰素、乙肝表面抗原和抗凝血酶Ⅲ等产物或从崂山奶山羊乳腺中获得了转基因产物。
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