题目内容
【题目】Ⅰ.（1）天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B，现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是（______）
A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经过逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B
B.利甩限制性核酸内切酶从开蓝色牵牛花的基因文库中获取基因B
C.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞
D.将基因B直接导人大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞
（2）干细胞是生物体生命进程中出现的一类未分化细胞，一旦需要，它可以分裂、分化形成各种组织干细胞，再进一步分化形成各种不荷的组织细胞。下列有关叙述中错误的是（______）
A.在适宜条件下,胚胎干细胞可以分化为多神组织
B.心脏干细胞分化形成心脏的过程表现了细胞的全能性
C.干细胞中含有本物种生物发育的全套遗传物质
D.运用胚胎干细胞可以培育动物器官或组织，开创人类疾病治疗的新方法
（3）美国科学家将荧光水母的一种物质注人白猪细胞中，然后将这些白猪的体细胞核植入黑猪的去核卵细胞中，最后将5枚重组卵放入黑猪的子宫内，产下的5只小猪中有4只小猪的嘴和蹄发出黄色荧光。下列相关叙述中，正确的是 （______）
A.产下的5只小猪性状与卵供体黑猪嘴相似，部分性状也可能与白猪相似
B.要提髙重组卵的成活率，对受体黑猪需要用雌激素进行超数排卵处理
C.导入荧光水母的某物质形碑的重组细啤，通过组织培养可形成新个体
D.注入白猪细胞的物质可能是荧光水母DNA，并已整合到白猪细胞核DNA中
Ⅱ.如图为纯种荷斯坦小奶牛的蘩殖过程，请据图回答下列问题。
（1）从供体母牛体内获取的卵母细胞，一般要在体外培养到_____________（时期）才能参与受精，从良种公牛体内获取的精子要经过__________________________处理才能受精。
（2）体内受精和人工授精的区别之一是场所不同，体内受精的场所是_____________，早期胚胎所需的培养液中除了有水、无机盐、维生素、核苷酸外，还需加入_____________等物质。
（3）如果培育转基因荷斯坦奶牛，可采用_______________________技术将药用蛋白基因导入到受精卵中，在检侧受体细胞中的染色体DNA上是否插入了目的基因时，常采用的方法是_____________技术，根据是否显示出杂交带进行鉴定。
（4）胚胎移植前要对受体母牛进行__________________________处理，胚胎能在受体母牛的子宫中成活，是因为_________________________________________________________________。
【答案】 A B D 减数第二次分裂中期（或MⅡ中期） 获能 输卵管 有机盐、激素、氨基酸以及血清 显微注射 DNA分子杂交 同期发情 受体对移入的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应
【解析】试题分析：基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因（基因B）的获取（从基因文库中获取、PCR技术体外扩增、人工合成）；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团），ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态；在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段。动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，所以动物细胞核移植产生的动物的细胞核基因均来自供体，而细胞质基因来自受体；对受体用雌激素进行超数排卵，可获得更多的卵细胞，对受体需要用促性腺激素进行同期发情处理。胚胎移植基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。
Ⅰ.（1）要获得矮牵牛中控制蓝色色素合成的基因B，可提取矮牵牛蓝色花mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B，A正确；控制蓝色色素合成的基因B属于真核生物的基因，而真核生物的基因一般不从基因文库中获取，B错误；目的基因与质粒的连接需要用DNA连接酶，而不是DNA聚合酶，C错误；目的基因需要和运载体连接后形成重组质粒再导入，而且应该用农杆菌进行感染，而不是大肠杆菌，D错误。
（2）在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞分化为多种细胞和组织，A正确；心脏干细胞分化形成心脏的过程未表现细胞的全能性，细胞全能性是发育成完整生物体的能力，B错误；干细胞来自于受精卵的有丝分裂，含有本物种生物发育的全套遗传物质，C正确；运用胚胎干细胞可以培植动物器官或组织，开创人类疾病治疗的新方法，D正确。
（3）产下的5只小猪的核基因均来自供体，所以其性状与核供体白猪最相似，部分性状与黑猪相似，A错误；要提高重组卵移植的成活率，对受体黑猪需要用促性腺激素进行同期发情处理，B错误；动物细胞培养过程没有脱分化和再分化过程，C错误；由于小猪表现为黄色荧光，说明注入白猪细胞的物质可能是荧光水母DNA，并已整合到白猪细胞核DNA中，D正确。
Ⅱ.（1）从供体母牛体内获取的卵母细胞，一般要在体外培养到MⅡ中期才能参与受精；精子要经过获能处理才能受精。
（2）体内受精和操作A（体外受精）的区别之一是场所不同，体内受精的场所是输卵管；早期胚胎所需的培养液中除了有水、无机盐、维生素、有机盐、激素、氨基酸、核苷酸外，还需加入血清。
（3）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；检测目的基因是否导入受体细胞常用DNA分子杂交技术中，根据是否显示出杂交带进行鉴定。
（4）胚胎移植前要对受体母牛进行同期发情处理，使胚胎移植入相同的生理环境；胚胎能在受体母牛的子宫中成活，是因为受体对移入的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应。
