题目内容
【题目】通过基因工程的方法，科学家采用花粉管通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并获得成功表达。棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊，进而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚体细胞中，借助天然的种胚系统，形成含有目的基因的种胚。请回答下列问题：
(1)下列所示的黏性末端是由________种限制性核酸内切酶作用产生的。
(2)利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞，此过程是基因工程操作步骤中的第三步，即__________________________。
获取目的基因时，如果基因比较小，核苷酸序列又已知，则可以通过DNA合成仪用化学方法直接_____________。
(3)该目的基因在导入受体细胞前需要与运载体结合，目前经常使用的运载体是_________。
(4)基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定，其中分子水平的检测又分三步：首先要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用的技术是________；其次还要检测________，方法同样是采用分子杂交技术；最后检测________，方法是________杂交。
【答案】4将目的基因导入受体细胞人工合成质粒DNA分子杂交技术基因是否转录出了mRNA目的基因是否翻译成蛋白质抗原-抗体
【解析】
本题旨在考查基因工程，
(1)限制性核酸内切酶能识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割磷酸二酯键。题图显示的黏性末端有4种，因此是由4种限制性核酸内切酶作用产生的。
(2)基因工程操作步骤中的第三步是：将目的基因导入受体细胞。获取目的基因时，如果基因比较小，核苷酸序列又已知，可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。
(3)质粒是基因工程中经常使用的载体。
(4)检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用DNA-DNA杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA，采用DNA-RNA杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质，采用抗原—抗体杂交技术。
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【题目】解磷微生物能分解有机磷,可降低水体富营养化程度。下图是从湖泊污泥中筛选解磷微生物的过程示意图,下表是分离纯化的结果。请回答下列问题:
记录项目:透明圈直径/菌落直径
菌落编号 | 1 | 2 | 3 |
48小时 | 1.6 | 2.8 | 3.0 |
72小时 | 2.2 | 1.2 | 5.0 |
96小时 | 2.3 | 1.2 | 4.2 |
(1)培养基的成分主要有牛肉膏、蛋白胨、NaCl无菌卵黄液,其中__________主要提供有机磷。从土壤中富集解磷微生物时,应选用__________(固体/液体)培养基。
(2)配制成10-1浓度稀释液时,用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1ml,移入盛有____ ml无菌水的试管中,并依次配制10-2～10-10的梯度稀释液。
(3)过程②、③为菌种分离纯化的过程,接种方法分别为__________、__________。
(4)分析菌种的分离纯化结果,应选择为__________号菌落进行扩大生产,原因是__________。
