用来治疗糖尿病的胰岛素,过去主要靠从动物体器官、组织中提取,但因受原料限制,无法推广。现在,可以用发酵工程的方法来生产胰岛素。若用大肠杆菌发酵来生产胰岛素,并结合基因工程,写出其生产过程:

(1)构建转入人胰岛素基因的工程菌。

①提取目的基因:用胰岛素基因探针从人的胰岛细胞中获取             ,再用      法制备人的胰岛细胞目的基因。

②目的基因与运载体结合:从大肠杆菌的细胞中提取       ,并用      酶切割质粒,使其露出               。用同一种酶切割目的基因使其产生相同的               ,再将目的基因插人质粒切口处,加入适量的               酶,这样就形成了一个                              的重组DNA。

③将目的基因导人受体细胞:将大肠杆菌用          处理,以增大               的通透性,让重组DNA进人大肠杆菌体内。

④目的基因的检测和表达:在用一定的方法检测出目的基因已导人大肠杆菌细胞内,并            后,再对该种大肠杆菌扩大培养。

(2)发酵生产。如图为发酵罐,回答:(括号中填数字,如[1]

①配制适合大肠杆菌的培养基,调整        ,然后对培养基进行             处理并装入发酵罐,将上述大肠杆菌接种于发酵罐发酵

②若经检测若发现放料口排出的旧培养基中微生物细胞形态多样,甚至出现畸形,则此时微生物的生长处于     期,加料口[   ]添加新培养基的速度应该适当     ,并从[   ]以适当速度通入     

③若该装置阶段发酵的目的是为扩大培养生产酵母菌菌种,则应尽可能延长         期,采取的主要措施为:加料口放料的速度都           ,通人的无菌空气成分中应           ,搅拌的速度适当             

④影响发酵过程中温度变化的因素是                

⑤发酵过程中pH变化的原因是                     

⑥搅拌器搅拌的作用是                          

(3)发酵完毕后,从培养基中                         胰岛素,经过一定的加工成为药用胰岛素,经           合格后,可投入使用。

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