题目内容
【题目】我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测,操作简图如图甲,伊红美蓝培养基配方如图乙。回答下列相关问题:
(1)图甲中滤膜的孔径应______(“大于”或“小于”)大肠杆菌。受此启发,对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌?______。
(2)配制图乙中的基础培养基时,除了水分、无机盐以外,还应加入______(一种营养成分),以及______。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色,从功能上划分,该培养基属于______培养基。
(3)该小组通过统计______的数目,计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际______(“偏高”或“偏低”),理由是______。
【答案】(1)小于 用滤膜过滤除菌
(2)氮源 琼脂 鉴别
(3)黑色菌落 偏低 两个或多个大肠杆菌连在一起时,平板上只能观察到1个菌落
【解析】(1)图甲操作的目的是用滤膜过滤待测水样,以获得大肠杆菌,因此滤膜的孔径应小于大肠杆菌。受此启发,对某些不耐高温的试剂,可以用滤膜过滤除菌。
(2)各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。图乙中的乳糖可为微生物的生长提供碳源,据此可知:在配制图乙中的基础培养基时,除了水分、无机盐以外,还应加入氮源。在固体培养基上大肠杆菌才能形成菌落,因此还需要加入琼脂。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色,从功能上划分,该培养基属于鉴别培养基。
(3)由“伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色”可知:该小组通过统计黑色菌落的数目,计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。当两个或多个大肠杆菌连在一起时,平板上只能观察到1个菌落,所以理论上他们的统计值要比实际偏低。
【题目】萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用,而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药,做了相关研究。
(1)研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒,得到重组质粒,再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中,获得转基因大肠杆菌。
(2)检测发现,转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低,研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好,因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物(引物B和C中都替换了一个碱基),并按图2方式依次进行4次PCR扩增,以得到新的蛋白A基因。
①这是一种定点的_________技术。
②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物?请填写以下表格(若选用该引物划“√”,若不选用该引物则划“×”)。
引物A | 引物B | 引物C | 引物D | |
PCR1 | ||||
PCR2 | ||||
PCR3 | ||||
PCR4 |
(3)研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌,提取培养液中的蛋白质,用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物,判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性,研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上,培养一段时间后,比较_________的大小,以确定表达产物的生物活性大小。
(4)作为微生物农药,使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌,其优点是_________。