题目内容
材料:饲料原料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中,猪、禽等动物由于缺乏有关酶,无法有效利用植酸,造成磷源浪费,而且植酸随粪便排出后易造成环境有机磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸,因此成为目前重要的饲料添加剂之一。
(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中,常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板,植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生________________,可根据其大小选择目的菌株,所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物,活性可用一定条件下单位时间的______________表示。
(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图:
Ⅰ中的主要成分为 ;Ⅱ中包含植酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。
(3)为构建基因工程菌,可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包括多次循环,每次循环包括三步:__________________________。反应过程中打开模板DNA双链的方法是__________。
(4)除植酸酶外,微生物还能应用在哪些酶的生产中?(至少写两种)
(1)透明圈(1分) 植酸钠的消耗量(肌醇和磷酸的生成量)(1分)
(2)小分子杂质(1分)
凝胶色谱法:根据蛋白质之间分子大小、吸附性质等差异进行纯化。(或电泳法:根据蛋白质之间电荷、分子大小等差异进行纯化。)(2分)
(3)变性、复性和延伸(1分) 加热(1分)
(4)蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶。(2分)
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