题目内容
【题目】（一）在冬季，部分地区出现严重雾霾，这与秸秆野外焚烧有一定关系。为破解秸秆处理瓶颈，微生物专家力图通过微生物降解技术使秸秆尽快腐烂掉，增加土壤肥力并缓解环境污染。回答下列有关问题：
（1）微生物专家发现某些细菌可以将纤维素分解为葡萄糖来提供营养。为从发黑的树干上分离出有分解纤维素能力的高产菌株，制备了以________为唯一碳源的选择培养基，将菌液进行一系列_____后，用_____（工具）将其涂布在培养基上得到单个菌落，再采用刚果红染色方法进行鉴定，得到目标菌落。那么，图中降解纤维素能力最强的菌株是__（填图中序号）。
（2）研究人员欲将筛选得到的纤维素分解菌进行大量培养，培养过程中应保持恒温箱中的温度约为__（填“4℃”、“20℃”或“35℃”）。若用稀释涂布法计数菌体数，统计结果通常比实际数目___，主要原因是_______________________。
（二）如图表示动物细胞克隆和制备单克隆抗体的相关过程。请回答相关问题：
注：干细胞具有较强的分裂能力
（1）过程①常采用_____法导入重组诱导基因后得到干细胞；部分干细胞经过诱导可分化成全身的不同组织或器官，是因为这些细胞具有__。
（2）该过程利用了甲细胞具有_____的能力，甲和乙细胞可经过生物诱导剂____的作用形成丙细胞。取一个丙细胞，放在含大量失去增殖力的小鼠成纤维细胞的特定培养体系中培养，使之繁衍成一个_______，这种方法为克隆培养法。
（3）在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基喋呤可以阻断此途径；另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化合成 DNA，而甲细胞的DNA合成没有此辅助途径。
①利用两条DNA合成途径的不同特点配制的相应培养基含有多种成分，其中添加的_______成分具有筛选丙细胞的作用。
②最终筛选获得的丙细胞的特点是__________________。
【答案】纤维素梯度稀释玻璃刮刀①35℃少当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落显微注射全套的遗传信息连续增殖（灭活的）病毒D细胞群（细胞株）氨基喋呤能无限增殖并分泌特异性抗体
【解析】
本题考查微生物的分离与计数、动物细胞工程，考查对分离纤维素分解菌、制备单克隆抗体技术流程的理解和识记。解答此题，可根据培养皿中透明圈的大小选择有分解纤维素能力的高产菌株，根据乙细胞的来源判断甲、乙细胞应具备的特点。
（1）根据微生物的营养需求，分离有分解纤维素能力的高产菌株，应以纤维素为唯一碳源配制选择培养基。将菌液进行一系列梯度稀释后，用玻璃刮刀将其涂布在培养基上，以得到单个菌落。在含有刚果红的培养基上，纤维素可以与刚果红结合呈现红色，纤维素被降解后红色消失，据图可知图中菌株①周围的透明圈最大，即降解纤维素能力最强的菌株是①。
（2）纤维素分解菌生活的的适宜温度较高，大量培养时恒温箱中的温度约为35℃。用稀释涂布法计数菌体数时，由于连在一起的两个或多个菌体增殖后形成一个菌落，所以统计结果通常比实际数目小。
（二）（1）将基因导入动物细胞常用显微注射法，经诱导得到的干细胞含有小鼠生长、发育所需要的全套遗传信息，所以部分干细胞经过诱导可分化成全身的不同组织或器官。
（2）H1N1病毒外壳注入小鼠体内，可刺激小鼠产生体液免疫，产生能分泌特定抗体的浆细胞乙，由于浆细胞高度分化，不能增殖，可与具有连续增殖能力的甲细胞经灭活病毒诱导，融合为丙细胞。取一个细胞，使之繁衍成一个细胞群（细胞株），这种方法称为克隆培养法。
（3）①甲细胞没有DNA合成的辅助途径，只有主要途径，在含有氨基喋呤的培养基上，甲细胞的DNA合成途径被阻断，浆细胞含有DNA合成的两条途径，但不增殖，只有丙细胞可利用浆细胞DNA合成的辅助途径进行DNA的合成，从而筛选出丙细胞。
②丙细胞具备了甲、乙细胞特点，表现为能无限增殖并分泌特异性抗体。
项目 | 第一次筛选 | 第二次筛选 |
筛选 原因 | 诱导融合后得到多种杂交细胞，另外还有未融合的细胞 | 由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以需经过选择性培养 |
筛选 方法 | 用特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)才能生长 | 用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群 |
筛选 目的 | 得到杂交瘤细胞 | 得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 |
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【题目】研究发现有机物X可解除植物的顶端优势。为探究有机物X的作用部位，研究人员用适宜浓度的含有有机物X的溶液、若干生长状况相同的幼苗为材料进行实验。以未经处理的幼苗为对照组，实验组的处理方式为（ ）
选项 | 处理方式 |
A | 在①②处同时涂抹等量有机物X溶液 |
B | 切除②，一组在①处，另一组在②处涂抹等量有机物X溶液 |
C | 切除①，一组在①处，另一组在②处涂抹等量有机物X溶液 |
D | 一组在①处，另一组在②处涂抹等量有机物X溶液 |
A. A B. B C. C D. D
