题目内容

【题目】类风湿性关节炎(RA)是一种自身免疫病,致残性强。研究表明,该病的病理改变与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)密切相关,而一种人鼠嵌合的抗TNF-α单克隆抗体能有效治疗RA。下图为该单克隆抗体制备过程示意图。

(1)图中的抗原A是______________,HAT培养基的作用是_______________。将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后的杂交细胞具有的特点是_______________

(2)医疗上,把单克隆抗体与化学药物或细胞毒素相结合制成“___________”,借助抗体的定向作用将药物带到病变细胞并将其杀死。

(3)单克隆抗体的特点是_______________________、可大量制备。单克隆抗体的制备涉及细胞工程中的________技术和_________技术。

【答案】肿瘤坏死因子-α(或TNF-α)筛选出杂交瘤细胞既能大量增殖,又能产生特异性抗体生物导弹特异性强灵敏度高动物细胞融合动物细胞培养

【解析】

本题考查细胞工程,考查单克隆抗体的制备流程及其应用,解答此题,可根据效应B淋巴细胞能产生单一抗体、骨髓瘤细胞能无限增殖分析注射抗原的原因和杂交瘤细胞特点,根据细胞融合的随机性分析HAT培养基的作用

(1)制备抗TNF-α单克隆抗体,首先应向小鼠体内注射抗原TNF-α,刺激小鼠体内的B淋巴细胞增殖分化,产生能分泌抗TNF-α抗体的浆细胞。由于B淋巴细胞和骨髓瘤细胞在融合时是随机的,且不会100%发生融合,融合体系中存在B淋巴细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞和未融合的细胞,因此需要通过HAT培养基筛选杂交瘤细胞。杂交瘤细胞具备了B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的特点,既能无限增殖,又能产生单一抗体。

(2)利用抗体可以和抗原特异性结合的特点,把单克隆抗体与化学药物或细胞毒素相结合,可以制成生物导弹,借助抗体的定向作用将药物带到病变细胞并将其杀死。

(3)与血清抗体相比,单克隆抗体具有特异性强灵敏度高,并且可大量制备的特点。图示过程中涉及动物细胞融合和动物细胞培养技术。

项目

第一次筛选

第二次筛选

筛选

原因

诱导融合后得到多种杂交细胞,另外还有未融合的细胞

由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激,所以需经过选择性培养

筛选

方法

用特定的选择培养基筛选:未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、瘤瘤细胞)都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞(“B细胞)才能生长

用多孔培养皿培养,在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测,经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群

筛选

目的

得到杂交瘤细胞

得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞

练习册系列答案
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______________

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①形成重组载体时,需用____________酶切割________________

②研究发现,let-7基因能影响RAS基因的表达,其影响机理如图乙所示。从分子水平的角度分析,其作用机理是let-7基因通过转录形成miRNA, _______________,从而抑制肺癌细胞的増殖。

③若let-7基因能影响RAS基因的表达,则在图甲传代培养的过程中,癌细胞的细胞周期将_________

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